特許
J-GLOBAL ID：202103020777080565
miRNAをブロックするための方法
発明者：
,
出願人/特許権者：
代理人 (1件)：
特許業務法人川口國際特許事務所
公報種別：特許公報
出願番号（国際出願番号）：特願2017-553115
特許番号：特許第6791875号
出願日： 2016年04月10日
請求項（抜粋）：
【請求項1】複数のマイクロRNA(miRNA)のうちの1つである望ましくないmiRNAが逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)に関与することを防止する方法であって、前記望ましくないmiRNAが、5’末端及び3’末端を有し、前記方法が、
(A)ブロッキング核酸の相補領域を、前記望ましくないmiRNAの第1の末端の結合部位にアニールすることと、ここで、前記望ましくないmiRNAの前記第1の末端が、前記5’末端または前記3’末端のうちの一方であり、
前記ブロッキング核酸が、
(a)前記ブロッキング核酸の5’末端及び前記ブロッキング核酸の3’末端と、
(b)Tmを10〜20°C下回る温度で前記望ましくないmiRNAの前記第1の末端の結合領域とアニールする、前記ブロッキング核酸の前記5’末端または前記ブロッキング核酸の前記3’末端のうちの一方の一本鎖相補領域であって、前記相補領域が末端を有する、一本鎖相補領域と、
(c)前記望ましくないmiRNAの前記第1の末端にライゲーションするためのライゲーション末端を有するヘアピンループ形成領域であって、前記相補領域に隣接するヘアピンループ形成領域と、
(d)前記相補領域の前記末端に連結される第1のブロッキング部分であって、リガーゼの基質としての役割を果たすことができない、第1のブロッキング部分と、を含むか、又は
(a)3’末端及び5’末端を有するCrick鎖と、
(b)Tmを10〜20°C下回る温度で前記望ましくないmiRNAの前記第1の末端の結合領域とアニールする、前記Crick鎖の前記5’末端または前記Crick鎖の前記3’末端のうちの一方の一本鎖相補領域であって、一本鎖相補領域と、
(c)前記相補領域に隣接する前記Crick鎖上の二本鎖領域であって、前記二本鎖領域が前記Crick鎖にアニールされるWatson鎖を含み、前記Watson鎖が5’末端及び3’末端を有する、二本鎖領域と、
(d)前記Crick鎖の前記3’末端に連結される第1のブロッキング部分であって、リガーゼの基質としての役割を果たすことができない、第1のブロッキング部分と、
(e)前記Crick鎖の前記5’末端に連結される第2のブロッキング部分であって、リガーゼの基質としての役割を果たすことができない、第2のブロッキング部分と、
(f)前記相補領域が前記Crick鎖の前記3’末端にある場合、前記Watson鎖の前記3’末端に連結される、または前記相補領域が前記Crick鎖の前記5’末端にある場合、前記Watson鎖の前記5’末端に連結される第3のブロッキング部分であって、リガーゼの基質としての役割を果たすことができない、第3のブロッキング部分と、
(g)前記Watson鎖上の前記望ましくないmiRNAの前記第1の末端にライゲーションするためのライゲーション末端であって、前記相補領域が前記Crick鎖の前記5’末端にある場合、前記Watson鎖の前記3’末端に、または前記相補領域が前記Crick鎖の前記3’末端にある場合、前記Watson鎖の前記5’末端に位置する、前記ライゲーション末端と、を含む、
(B)前記工程(A)の前又は後に、アデニル化核酸アダプターを前記複数のmiRNAにライゲーションすることと、
(C)前記複数のmiRNAに対してRT-PCRを行うことと、
を含む、方法。
IPC (4件)：
C12Q 1/6848 ( 201 8.01)
, C12Q 1/6855 ( 201 8.01)
, C12Q 1/686 ( 201 8.01)
, C12N 15/113 ( 201 0.01)
C12Q 1/684 ZNA Z
, C12Q 1/685 Z
, C12Q 1/686 Z
, C12N 15/113 Z
