抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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膠芽腫腫瘍は広範な腫瘍内および腫瘍内不均一性を示し,多くの臨床試験の転帰不良に寄与し,効果的な治療戦略の開発を複雑にする。現在のin vitroモデルは,親腫瘍の細胞および変異多様性を保存せず,しばしば可変効率で長い世代時間を必要とする。ここでは,細胞解離のない化学的に定義された培地を用い,外科的に切除した患者腫瘍組織から膠芽腫器官(GBO)を生成するための詳細な手順を述べた。細胞-細胞相互作用の保存とクローン選択の最小化により,GBOは親腫瘍の細胞不均一性を維持する。継続的な使用,バイオバンク,および長期回復のためのGBOの通過と低温保存のための方法を含む。さらに,キメラ抗原受容体(CAR)T細胞とGBOを共培養することにより,免疫療法に対する患者特異的応答を研究するための手順を述べた。このプロトコルは,CAR-T細胞共培養を行うため,GBOと5~7日を生成するために約2~4週間を要した。ヒト細胞培養,組織処理,免疫組織学および顕微鏡との競合は,最適な結果に必要である。切除された患者腫瘍組織から膠芽腫器官を発生し,バイオバンクする短いSummary Detail手順と,共培養によるCAR-T細胞の有効性を試験する。組織プロセシング,免疫組織学,および低酸素勾配と活発に増殖する細胞を検出する付加的手順。Key Reference Jacob,F.et al.A患者由来膠芽腫オルガノイドモデルおよびバイオバンクに対する関連リンクボックスは,腫瘍内および腫瘍内不均一性を再現した。細胞180,188-204e122,doi:10.1016/j.cell.2019.11.036(2020)。【JST・京大機械翻訳】