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J-GLOBAL ID：202202217287866336   整理番号：22A0566785

Thermococcus barophilus Ch5由来の新規フラップエンドヌクレアーゼ1の生化学的特性化と変異解析【JST・京大機械翻訳】

Biochemical characterization and mutational analysis of a novel flap endonuclease 1 from Thermococcus barophilus Ch5

著者 (10件)： Lin Tan (College of Environmental Science and Engineering, Marine Science & Technology Institute, Yangzhou University, China) ,  Zhang Likui (College of Environmental Science and Engineering, Marine Science & Technology Institute, Yangzhou University, China) ,  Jiang Donghao (College of Environmental Science and Engineering, Marine Science & Technology Institute, Yangzhou University, China) ,  Wu Leilei (College of Environmental Science and Engineering, Marine Science & Technology Institute, Yangzhou University, China) ,  Chen Kaige (College of Environmental Science and Engineering, Marine Science & Technology Institute, Yangzhou University, China) ,  Li Li (College of Environmental Science and Engineering, Marine Science & Technology Institute, Yangzhou University, China) ,  Jin Cuili (College of Environmental Science and Engineering, Marine Science & Technology Institute, Yangzhou University, China) ,  Jin Cuili (Jiangsu Key Laboratory of Marine Bioresources and Environments, Jiangsu Ocean University, China) ,  Li Zheng (College of Plant Protection, Agricultural University of Hebei, Baoding, China) ,  Oger Philippe (Univ Lyon, INSA de Lyon, CNRS UMR 5240, Villeurbanne, France)
資料名： International Journal of Biochemistry & Cell Biology  (International Journal of Biochemistry & Cell Biology)
巻： 143  ページ： Null  発行年： 2022年 
JST資料番号： B0255C  ISSN： 1357-2725  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Flapエンドヌクレアーゼ1(FEN1)は,DNA複製,修復および組換えにおいて重要な役割を果たす。ここでは,超好熱性真核生物Thermococcus barophilus Ch5(Tb-FEN1)由来の新規FEN1の生化学的特性と触媒機構を報告する。予想されたように,組換えTb-FEN1は5′-フラップDNAを切断できる。しかし,酵素は偽Y DNAの開裂に活性を持たず,他の古細菌および真核生物FEN1相同体とは対照的であった。Tb-FEN1は100°Cで20分間加熱後に24%の相対活性を保持し,これは報告された全てのFEN1蛋白質の中で最も熱安定性であることを示した。酵素は7.0から9.5までの広範囲のpHで最大の活性を示した。Tb-FEN1活性は二価金属イオンに依存し,その中でMg2+とMn2+が最適であった。酵素活性はNaClによって阻害される。速度論的分析は,Tb-FEN1によるDNAからの5′-フラップの除去の活性化エネルギーが35.7±4.3kcal/molであり,これはFEN1酵素によるDNAから5′-フラップを切断するエネルギー障壁に関する最初の報告である。変異研究は,K87A,R94AおよびE154Aアミノ酸置換が切断活性を消失させ,5’-フラップDNA結合効率を低下させ,Tb-FEN1における残基K87,R94およびE154が触媒およびDNA結合にも必須であることを示す。全体として,Tb-FEN1は異常な特徴を有する極めて安定なエンドヌクレアーゼである。Copyright 2022 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 活性化エネルギー ,  *フラップ ,  酵素 ,  塩化ナトリウム ,  DNA【核酸】 ,  酵素活性度 ,  タンパク質 ,  *エンドヌクレアーゼ ,  DNA複製 ,  真核生物 ,  古細菌
準シソーラス用語： *Thermococcus ,  アミノ酸置換 ,  DNA結合 ,  残基 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： 超好熱性古細菌 ,  フラップエンドヌクレアーゼ1 ,  DNA複製と修復 ,  生化学的特性 ,  変異研究

分類 (3件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子の複製  (EC02030F) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (4件)： Thermococcus ,  フラップエンドヌクレアーゼ1 ,  生化学的特性 ,  変異解析