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J-GLOBAL ID:202202219069768693   整理番号:22A0376694

単一分子局在化顕微鏡法における閉込め生体分子確率運動を制限することによる局在化精度の改善【JST・京大機械翻訳】

Improved localization precision via restricting confined biomolecule stochastic motion in single-molecule localization microscopy
著者 (18件):
資料名:
巻: 11  号:ページ: 53-65  発行年: 2022年 
JST資料番号: U8087A  ISSN: 2192-8614  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: ドイツ (DEU)  言語: 英語 (EN)
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単一分子局在化顕微鏡(SMLM)は,生物学的研究においては,確率的に活性化されず,SMLMによって正確に位置するので,回折限界のために,ナノメートルサイズの生体分子がほとんど分解されないという生物学的研究において,置換できない役割を演ずる。SMLMのために予め固定化された生物学的サンプルに対して,ほとんどの生体分子は架橋され,それらの固定化部位で制約されるが,それらのナノメートルサイズに関して限定された確率的運動を受けることが予想される。しかし,SMLMにおける局在化精度に対する閉じ込め生体分子確率運動の検出可能性と影響について,直接証拠のほとんどは報告されていない。ここでは,Alexa Fluor-647-共役オリゴヌクレオチドの逐次イメージング中の異なるフレームでの局在化の2つの間の変位を計算することにより,各固定化単一生体分子に対する潜在的確率運動をアクセスした。ほとんどの分子に対して,局在化変位は,試料ドリフト補正後でさえ,最短間隔よりもランダムフレーム間隔において著しく大きく,間隔時間と共に増加し,次に飽和し,生体分子確率運動を検出し,SMLMにおける固定化サイズの周りに閉じ込めることを示した。さらに,局在化精度は,閉じ込めた生体分子確率運動に反比例するが,生体分子を拡大または後架橋段階を追加することにより,それぞれ悪化または改善することができる。一貫して,チューブリン蛋白質にまばらに染色された細胞試料の後架橋は,より良い局在化精度をもたらした。全体として,本研究は,固定化生体分子の限定された確率的運動がSMLMにおける局在化精度を悪化させ,局在化精度の改善がそのような動きを制限することにより達成できることを明らかにした。Please refer to the publisher for the copyright holders. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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生体の顕微鏡観察法  ,  蛋白質・ペプチド一般 

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