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J-GLOBAL ID：202202221731468071   整理番号：22A0366541

超小型Cas12f1と改変型ガイドRNAをアデノ随伴ウイルスで送達する効率的なCRISPR編集

Efficient CRISPR editing with a hypercompact Cas12f1 and engineered guide RNAs delivered by adeno-associated virus

著者 (18件)： KIM Do Yon (Genome Editing Res. Center, Korea Res. Inst. of Bioscience & BioTechnology, Daejeon, KOR) ,  LEE Jeong Mi (Genome Editing Res. Center, Korea Res. Inst. of Bioscience & BioTechnology, Daejeon, KOR) ,  MOON Su Bin (Genome Editing Res. Center, Korea Res. Inst. of Bioscience & BioTechnology, Daejeon, KOR) ,  CHIN Hyun Jung (Genome Editing Res. Center, Korea Res. Inst. of Bioscience & BioTechnology, Daejeon, KOR) ,  KIM Daesik (Genome Editing Res. Center, Korea Res. Inst. of Bioscience & BioTechnology, Daejeon, KOR) ,  KO Jeong-Heon (Genome Editing Res. Center, Korea Res. Inst. of Bioscience & BioTechnology, Daejeon, KOR) ,  KIM Yong-Sam (Genome Editing Res. Center, Korea Res. Inst. of Bioscience & BioTechnology, Daejeon, KOR) ,  KIM Do Yon (KRIBB School of Bioscience, Korea Univ. Sci. and Technol., Daejeon, KOR) ,  LEE Jeong Mi (KRIBB School of Bioscience, Korea Univ. Sci. and Technol., Daejeon, KOR) ,  MOON Su Bin (KRIBB School of Bioscience, Korea Univ. Sci. and Technol., Daejeon, KOR) ,  KO Jeong-Heon (KRIBB School of Bioscience, Korea Univ. Sci. and Technol., Daejeon, KOR) ,  KIM Yong-Sam (KRIBB School of Bioscience, Korea Univ. Sci. and Technol., Daejeon, KOR) ,  KIM Do Yon (GenKOre, Daejeon, KOR) ,  PARK Seyeon (GenKOre, Daejeon, KOR) ,  LIM Youjung (GenKOre, Daejeon, KOR) ,  KIM Yong-Sam (GenKOre, Daejeon, KOR) ,  KOO Taeyoung (Dep. of Biomedical and Pharmaceutical Sci., Graduate School, Kyung Hee Univ., Seoul, KOR) ,  KOO Taeyoung (Dep. of Pharmaceutical Sci., Coll. of Pharmacy, Kyung Hee Univ., Seoul, KOR)
資料名： Nature Biotechnology  (Nature Biotechnology)
巻： 40  号： 1  ページ： 94-102  発行年： 2022年01月 
JST資料番号： H0870A  ISSN： 1087-0156  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 小さなアデノ随伴ウイルス(AAV)のゲノムに収まって,真核細胞で高い切断活性と特異性を発揮する小型のCRISPR系があれば,遺伝子治療への恩恵となる。これまでに発見されている最小級のCRISPR関連ヌクレアーゼとして,アーキアのUn1Cas12f1がある。しかし,Un1Cas12f1とそのバリアントは真核細胞での活性が極めて低い。本研究では,Un1Cas12f1の天然型ガイドRNAを5か所で再設計した[トランス活性化型CRISPR RNA(tracrRNA)の5′末端,tracrRNA-crRNA相補性領域,ペンタ(ウリジン)塩基配列,crRNAの3′末端,tracrRNAの変性したステム2領域)。これらの最適化により,挿入欠失の平均頻度は相乗的に高まって867倍となった。最適化されたUn1Cas12f1系をプラスミドベクター,PCRアンプリコン,AAVによって送達すると,ヒト細胞で効率的かつ特異的なゲノム編集が行われた。Un1Cas12f1はプロトスペーサーの外側で切断するため,これを用いることによって大きな欠失が効率的に得られる。この改変型Un1Cas12f1系の効率はSpCas9に匹敵し,特異性はAsCas12aと同等であった。Copyright Nature Japan KK 2022

シソーラス用語： 最適化 ,  ヌクレアーゼ ,  ヌクレオチド配列 ,  ヒト ,  ゲノム ,  真核細胞 ,  相補性 ,  古細菌 ,  遺伝子療法 ,  *アデノ随伴ウイルス
準シソーラス用語： *gRNA ,  アンプリコン ,  特異性 ,  *CRISPR配列 ,  プラスミドベクター , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (6件)： 改変 ,  ガイドRNA ,  アデノ随伴ウイルス ,  送達 ,  CRISPR ,  編集