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J-GLOBAL ID：202202221852577591   整理番号：22A0448613

トランスジェニックブルーベリーにおけるCRISPR Cas9とCas12a仲介gusAエディティング【JST・京大機械翻訳】

CRISPR Cas9- and Cas12a-mediated gusA editing in transgenic blueberry

著者 (10件)： Han Xiaoyan (Plant Biotechnology Resource and Outreach Center, Department of Horticulture, Michigan State University, East Lansing, MI, USA) ,  Han Xiaoyan (Beijing Botanical Garden, Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Beijing, People’s Republic of China) ,  Yang Yingzhen (Grape Genetics Research Unit, USDA-Agricultural Research Service, Geneva, NY, USA) ,  Han Xue (Plant Biotechnology Resource and Outreach Center, Department of Horticulture, Michigan State University, East Lansing, MI, USA) ,  Ryner John T. (Plant Biotechnology Resource and Outreach Center, Department of Horticulture, Michigan State University, East Lansing, MI, USA) ,  Ahmed Emadeldin A. H. (Plant Biotechnology Resource and Outreach Center, Department of Horticulture, Michigan State University, East Lansing, MI, USA) ,  Ahmed Emadeldin A. H. (Breeding Research Department of Fruit Trees, Ornamental and Woody Plants, Horticulture Research Institute, Agricultural Research Center, Giza, Egypt) ,  Qi Yiping (Department of Plant Science and Landscape Architecture, University of Maryland, College Park, MD, USA) ,  Zhong Gan-yuan (Grape Genetics Research Unit, USDA-Agricultural Research Service, Geneva, NY, USA) ,  Song Guo-qing (Plant Biotechnology Resource and Outreach Center, Department of Horticulture, Michigan State University, East Lansing, MI, USA)
資料名： Plant Cell, Tissue and Organ Culture  (Plant Cell, Tissue and Organ Culture)
巻： 148  号： 2  ページ： 217-229  発行年： 2022年 
JST資料番号： W0852A  ISSN： 0167-6857  CODEN： PTCEDJ  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： ドイツ (DEU)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ブルーベリー育種のための効果的なゲノム編集ツールを開発するために,CRISPR-Cas9とCRISPR-Cas12aを,単一コピー導入遺伝子である2つのブルーベリー品種に以前に導入したマーカー遺伝子β-グルクロニダーゼ(gusA)の編集効率について評価した。35SプロモーターまたはAtUbiプロモーターにより駆動されるCRISPR-Cas9およびCRISPR-Cas12aを用いて,4つの発現ベクターを構築した。各ベクターはgusAの2つの編集部位を含んでいた。これらの4つのベクターをトランスジェニックgusAブルーベリーの葉外植体にそれぞれ形質転換し,得られたトランスジェニックカルスをハイグロマイシン選択下で誘導した。GUS染色は,ヒグロマイシン耐性カルスの若干の小さな割合が,非GUS染色セクターを持ち,gusA編集のいくつかの可能な発生を示唆した。3つのブルーベリー組織で2つの編集部位を網羅するGUSアンプリコンを配列決定し,35S-Cas9ベクターで形質転換したカルスから編集特徴を持つ約5.5%のアンプリコンを見出した。さらに,初期Cas9およびCas12a含有カルス(T_0)由来の葉外植片からのシュート再生の2回目のラウンドを行い,標的編集領域のアンプリコンを分析した。新しく誘導されたシュートのうち,35S-Cas9の15.5%とAtUbi-Cas9の5.3%は,非GUS染色を示したが,Cas12aベクターを含むシュートの全ては青色染色を示した。サンガー配列決定により,2つの代表的非GUS染色系統における編集誘導変異を確認した。明らかに,再生の第二ラウンドはエディティング事象を豊富にし,編集シュートの生産を強化した。結果は,CRISPR Cas技術を用いたブルーベリーの高精度育種の促進に役立つであろう。重要なメッセージ:再生の第二ラウンドは編集事象を濃縮し,編集されたブルーベリーシュートの生産を強化した。記述した新しいプロトコルは,CRISPR Cas技術を用いたブルーベリーの高精度育種を促進する。Copyright The Author(s), under exclusive licence to Springer Nature B.V. 2021 Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *ブルーベリー ,  染色 ,  育種 ,  カルス ,  品種 ,  プロモーター領域 ,  ベクター ,  脂環式化合物 ,  フェノール類 ,  ケトース ,  酸素複素環化合物 ,  カルボアミド ,  デオキシ糖 ,  不飽和カルボン酸 ,  フラノシド ,  アミノアルコール ,  ポリオール
準シソーラス用語： 導入遺伝子 ,  アンプリコン ,  β-グルクロニダーゼ ,  マーカー遺伝子 ,  発現ベクター ,  *Cas9 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： ブルーベリー ,  CRISPR-Cas9 ,  CRISPR-Cas12a ,  遺伝子編集 ,  GUS

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

物質索引 (1件)： ハイグロマイシン

タイトルに関連する用語 (5件)： ブルーベリー ,  CRISPR ,  Cas9 ,  仲介 ,  エディティング