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J-GLOBAL ID：202202232896867442   整理番号：22A0230565

高度精製新生児マウスミクログリアおよび星状細胞の単離のための新規プロトコル【JST・京大機械翻訳】

Novel protocol for the isolation of highly purified neonatal murine microglia and astrocytes

著者 (11件)： Zelenka Laura (Institute of Microbiology and Epizootics, Centre of Infection Medicine, Freie Universitaet Berlin, Robert-von-Ostertag-Strasse 7-13, 14163 Berlin, Germany) ,  Paegelow Dennis (Institute of Microbiology and Epizootics, Centre of Infection Medicine, Freie Universitaet Berlin, Robert-von-Ostertag-Strasse 7-13, 14163 Berlin, Germany) ,  Krueger Christina (Institute of Cell Biology and Neurobiology, Charite - Universitaetsmedizin Berlin, Corporate Member of Freie Universitaet Berlin, Humboldt-Universitaet zu Berlin, and Berlin Institute of Health, Berlin, Germany) ,  Seele Jana (University Medical Center Gottingen, Institute of Neuropathology, Gottingen, Germany) ,  Ebner Friederike (Freie Universitaet Berlin, Institute of Immunology, Berlin, Germany) ,  Rausch Sebastian (Freie Universitaet Berlin, Institute of Immunology, Berlin, Germany) ,  Rohde Manfred (Central Facility for Microscopy, Helmholtz Centre for Infection Research, Braunschweig, Germany) ,  Lehnardt Seija (Institute of Cell Biology and Neurobiology, Charite - Universitaetsmedizin Berlin, Corporate Member of Freie Universitaet Berlin, Humboldt-Universitaet zu Berlin, and Berlin Institute of Health, Berlin, Germany) ,  Lehnardt Seija (Department of Neurology, Charite - Universitaetsmedizin Berlin, Corporate Member of Freie Universitaet Berlin, Humboldt-Universitaet zu Berlin, and Berlin Institute of Health, Berlin, Germany) ,  van Vorst Kira (Institute of Microbiology and Epizootics, Centre of Infection Medicine, Freie Universitaet Berlin, Robert-von-Ostertag-Strasse 7-13, 14163 Berlin, Germany) ,  Fulde Marcus (Institute of Microbiology and Epizootics, Centre of Infection Medicine, Freie Universitaet Berlin, Robert-von-Ostertag-Strasse 7-13, 14163 Berlin, Germany)
資料名： Journal of Neuroscience Methods  (Journal of Neuroscience Methods)
巻： 366  ページ： Null  発行年： 2022年 
JST資料番号： A1129A  ISSN： 0165-0270  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 細胞タイプグリア,特にミクログリアと星状細胞のクロストークと反応性は,自然免疫応答により調節される適切な脳機能の理解において,次第に研究の注目を集めている。したがって,細胞特異的レベルでの分析のための高度に実行可能で純粋なグリアを分離する方法は不可欠である。以前に確立された技術:動物数は,同じ混合グリア培養からの多重ミクログリア収穫によって減少し,それによって3Rs(置換,還元,および精製)の原理に従って,ミクログリア収率を最大化する。分離した単一細胞懸濁液を直接ソーティングする代わりに,培養初代グリア細胞懸濁液を適用することにより,ミクログリアと星状細胞の磁気活性化細胞ソーティング(MACS)を最適化した。著者らは,FACS分析により確認されたように,1つの混合培養に由来する非常に実行可能で純粋なミクログリアと星状細胞を,純度ΔΨ99%で産生した。電界放出走査電子顕微鏡(FESEM)はMACS精製グリア細胞の完全性を示した。腫瘍壊死因子(TNF)およびインターロイキン-10(IL-10)ELISAは,精製グリアにおいて機能的であるプロ-および抗炎症応答を確認したが,非精製細胞と比較して有意に弱くなり,さらに適切な免疫活性化に対する細胞クロストークの重要性を強調した。単一型のグリアを分離し,または他の細胞型との相当な割合の汚染を示す以前の研究とは異なり,増加した純度(99~100%)でミクログリアと星状細胞の両方の分離を達成した。初代ミクログリアと星状細胞の両方を効率的に精製するための最適化プロトコルを作成した。本結果は,特に星状細胞に当てはまる免疫応答を調べるために,グリア細胞培養における純度の重要性を明確に示す。CNS疾患のフレームにおけるミクログリアと星状細胞間の細胞型特異的クロストークを研究するためのツールとしての新規プロトコルを提案した。Copyright 2022 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 懸濁液 ,  最適化 ,  純度 ,  新生児 ,  ソーティング ,  生存率 ,  細胞分画法 ,  *グリア細胞 ,  初代培養 ,  インターロイキン ,  TNF【壊死因子】 ,  *星状細胞 ,  クロストーク ,  *ミクログリア
準シソーラス用語： 単一細胞 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (7件)： グリア細胞 ,  ミクログリア ,  星状細胞 ,  一次細胞培養 ,  磁気活性化細胞選別(MACS) ,  純度 ,  生存率

分類 (2件)： 神経の基礎医学  (GN01020W) ,  神経系一般  (EJ12010J)

タイトルに関連する用語 (8件)： 高度 ,  精製 ,  新生児 ,  マウス ,  ミクログリア ,  星状細胞 ,  単離 ,  プロトコル