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J-GLOBAL ID：202202234201464653   整理番号：22A1112572

マウス大動脈細胞の分離および培養と大動脈内膜および媒質のRNA分離:アテローム性動脈硬化症研究のための迅速で最適化されたアプローチ【JST・京大機械翻訳】

Isolation and culture of murine aortic cells and RNA isolation of aortic intima and media: Rapid and optimized approaches for atherosclerosis research

著者 (11件)： Chen Jingshu (Department of Medicine, Cardiovascular Division, Brigham and Women’s Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA, 02115, USA) ,  Zhuang Rulin (Department of Medicine, Cardiovascular Division, Brigham and Women’s Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA, 02115, USA) ,  Zhuang Rulin (Department of Cardiovascular Surgery, Shanghai East Hospital, Tongji University School of Medicine, Shanghai, 200120, China) ,  Cheng Henry S. (Department of Medicine, Cardiovascular Division, Brigham and Women’s Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA, 02115, USA) ,  Jamaiyar Anurag (Department of Medicine, Cardiovascular Division, Brigham and Women’s Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA, 02115, USA) ,  Assa Carmel (Department of Medicine, Cardiovascular Division, Brigham and Women’s Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA, 02115, USA) ,  McCoy Michael (Department of Medicine, Cardiovascular Division, Brigham and Women’s Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA, 02115, USA) ,  Rawal Shruti (Department of Medicine, Cardiovascular Division, Brigham and Women’s Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA, 02115, USA) ,  Perez-Cremades Daniel (Department of Medicine, Cardiovascular Division, Brigham and Women’s Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA, 02115, USA) ,  Perez-Cremades Daniel (Department of Physiology, University of Valencia and INCLIVA Biomedical Research Institute, Valencia, 46010, Spain) ,  Feinberg Mark W. (Department of Medicine, Cardiovascular Division, Brigham and Women’s Hospital, Harvard Medical School, Boston, MA, 02115, USA)
資料名： Atherosclerosis  (Atherosclerosis)
巻： 347  ページ： 39-46  発行年： 2022年 
JST資料番号： E0599B  ISSN： 0021-9150  CODEN： ATHSBL  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： マウス大動脈からの細胞成分の分離は,アテローム性動脈硬化症研究における発現または機能解析に一般的に使用される。しかしながら,初代細胞を分離する現在の方法は,困難で,非効率であり,別々のマウスを必要とする。トランスクリプトミクス分析のための大動脈内膜と培地からのRNA抽出も,混合RNA収量で困難と考えられる。これらのギャップに取り組むために,著者らは提供する。1)免疫磁気細胞分離を用いてマウス大動脈から同時に多様な細胞型を分離し,培養するための迅速,効率的なプロトコル;2)内膜と培地からの効率的なRNA分離のための最適化大動脈内膜剥離技術。大動脈細胞は酵素溶液を用いて得られ,異なる細胞型は内皮細胞(CD31+),白血球(CD45+)および線維芽細胞(CD90.2+)を標的とする抗体に結合した磁性ビーズによって分離され,平滑筋細胞は陰性選択によって分離された。本プロトコルは,細胞マーカー遺伝子発現,免疫蛍光,およびフローサイトメトリーによって検証された高純度(>90%)で予測可能な方法で,比較的多数の細胞(10,000細胞/大動脈)の分離を可能にする。これら細胞は,細胞培養で増殖すると,全て機能的に活性である。また,内膜剥離アプローチを用いてLdlr-/-マウスから大動脈内膜濃縮RNAを収集する迅速法を提供し,加速病変形成に関連するトランスクリプトームプロファイリングを評価した。このプロトコルは,マウス大動脈壁からの異なる細胞型の磁気ビーズに基づく分離のための効果的な手段を提供し,分離細胞はアテローム性動脈硬化症を含む血管疾患の範囲に対する機能的および機構的研究に利用できる。Copyright 2022 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *最適化 ,  白血球 ,  *RNA【核酸】 ,  抗体 ,  細胞培養 ,  線維芽細胞 ,  *大動脈 ,  培地 ,  *マウス ,  磁気 ,  フローサイトメトリー ,  内皮細胞 ,  遺伝子発現 ,  *アテローム性動脈硬化症
準シソーラス用語： *内膜 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (4件)： アテローム性動脈硬化症 ,  大動脈一次細胞 ,  磁気ビーズ細胞分離 ,  内膜剥離

分類 (1件)： 循環系の基礎医学  (GJ01020K)

タイトルに関連する用語 (11件)： マウス ,  大動脈 ,  細胞 ,  培養 ,  内膜 ,  媒質 ,  RNA ,  アテローム性動脈硬化症 ,  研究 ,  迅速 ,  最適化