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J-GLOBAL ID:202202234562681576   整理番号:22A0988959

PMA-qPCR定量によるVBNC腸炎ビブリオの定量法の確立と最適化【JST・京大機械翻訳】

Development and optimization of PMA-qPCR for the quantitative detection of viable but non-culturable Vibrio parahaemolyticus
著者 (3件):
資料名:
巻: 48  号:ページ: 247-252  発行年: 2022年 
JST資料番号: C2153A  ISSN: 0253-990X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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腸炎ビブリオ(Vibrioparahaemolyticus)は、ある不利な成長の自然と食品加工条件下で生きている非培養(viablebutnon-culturable、VBNC)状態に進入できる。普通の検査方式は極めて漏れやすいため、VBNC細菌検出技術の開発と最適化は腸炎ビブリオの感染予防に重要な意義を持つ。プロピジウム臭化プロピジウムと蛍光定量PCR技術(propidiummonoazidequantitativePCR,PMA-qPCR)に基づき、生細胞の膜完全性を利用して生菌と死菌の原理を区別できる。腸炎ビブリオATCC17802を対象に、PMA-qPCR法における各因子が生菌計数結果に与える影響を検討することにより、VBNC腸炎ビブリオの定量測定方法を最適化し、確立した。その結果,15mg/LのPMAを添加したとき,10分間の暗いインキュベーション後に,DNAの増幅は,15分間の照射後に効果的に抑制され,そして,DNAテンプレートの増幅は,より正確であった。生菌数とqPCR増幅サイクル数は,有意な線形相関を示した(R2=0.99)。PMA-qPCR法による腸炎ビブリオの生菌数の検量線は、この方法の検出範囲が2.90×1012.90×108CFU/mLであり、検証回収率は92.97%99.57%で、相対標準偏差は1.95%であった。本論文では、より精確なVBNC腸炎ビブリオの定量測定方法を確立し、後続のさらなる研究に有効な技術手段を提供した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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微生物検査法  ,  水産生物学一般 
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