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J-GLOBAL ID：202202234731901007   整理番号：22A0003092

羊における使用に適したヒツジヘルペスウイルス2のための組換えELISAの開発【JST・京大機械翻訳】

Development of a recombinant ELISA for ovine herpesvirus 2, suitable for use in sheep

著者 (8件)： Russell George C. (Moredun Research Institute, Pentlands Science Park, Midlothian, UK) ,  Percival Ann (Moredun Research Institute, Pentlands Science Park, Midlothian, UK) ,  Grant Dawn M. (Moredun Research Institute, Pentlands Science Park, Midlothian, UK) ,  Bartley Kathryn (Moredun Research Institute, Pentlands Science Park, Midlothian, UK) ,  Turnbull Dylan (Moredun Research Institute, Pentlands Science Park, Midlothian, UK) ,  McLean Kevin (Moredun Research Institute, Pentlands Science Park, Midlothian, UK) ,  Lienhard Julia (Institute of Virology, Vetsuisse Faculty of the University of Zurich, Zuerich, Switzerland) ,  Bachofen Claudia (Institute of Virology, Vetsuisse Faculty of the University of Zurich, Zuerich, Switzerland)
資料名： Journal of Virological Methods  (Journal of Virological Methods)
巻： 299  ページ： Null  発行年： 2022年 
JST資料番号： E0807B  ISSN： 0166-0934  CODEN： JVMEDH  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 血清学的試験のための潜在的抗原として同定されたヒツジヘルペスウイルス2のマイナーカプシド蛋白質を過剰発現し,精製し,ELISAでのその評価を可能にした。対応する遺伝子配列(OvHV-2orf65,Ov65)を修飾して,遺伝子の大腸菌コドン最適化版におけるエピトープタグと内部制限酵素部位を組み込んだ。このコドン最適化遺伝子は,蛋白質溶解性と抗原性を維持しながら除去できる蛋白質の領域を同定するために内部欠失を受けた。遺伝子(Ov65delB)の保存5′-末端の欠失を有する誘導体は,細菌で過剰発現すると可溶性であるポリペプチドを発現し,OvHV-2特異的血清により検出された。アフィニティー精製Ov65delBのプロテオミクス分析は,それが複数の予測Ov65トリプシンペプチドを含むが,大腸菌蛋白質の同時精製による汚染も示すことを示した。この親和性精製OV65delBに基づく間接ELISAを,ヒツジおよびウシ試料を用いて最適化し,カットオフ値を既知の陰性血清試料に基づいて確立した。推定感染(UKヒツジ)またはPCRによるOvHV-2陽性または陰性試験(ウシMCF診断試料)のいずれかの試料の分析は,このアッセイがヒツジ血清に対して95%の感度と96%の特異性を有することを示した。そして,ウシ血清に対する80%の感受性と95%の特異性を示した。ウシサンプルによる低い感受性は,いくつかのMCF影響ウシにおける血清学的応答の欠如によるようであった。したがって,この組換え抗原は,MCF影響動物とOvHV-2貯蔵宿主の両方でOvHV-2特異的抗体応答を検出するのに使用できる,安価で簡単で信頼できる試験の基礎として有望であった。Copyright 2022 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 最適化 ,  大腸菌 ,  ポリペプチド ,  遺伝子 ,  血清 ,  抗原 ,  抗体 ,  タンパク質 ,  免疫原性 ,  *ELISA ,  エピトープ ,  プロテオミクス
準シソーラス用語： 過剰発現 ,  アフィニティー精製 ,  コドン最適化 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： 血清学 ,  悪性カタル熱 ,  抗原 ,  カプシド蛋白質 ,  診断試験

分類 (1件)： 蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N)

タイトルに関連する用語 (6件)： 羊 ,  ヒツジ ,  ヘルペスウイルス ,  組換え ,  ELISA ,  開発