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J-GLOBAL ID:202202235558783106   整理番号:22A0795371

SpyTag/Catcher化学は大腸菌における活性封入体の形成を誘導する【JST・京大機械翻訳】

SpyTag/Catcher chemistry induces the formation of active inclusion bodies in E. coli
著者 (7件):
資料名:
巻: 199  ページ: 358-371  発行年: 2022年 
JST資料番号: T0898A  ISSN: 0141-8130  CODEN: IJBMDR  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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SpyTag/Catcher化学は,通常,自発的分子内イソペプチド結合形成を用いて,頭から尾への環化を介して堅牢な酵素をエンジニアするために適用される。しかし,SpyTag/Catcher誘導in vivoでの細胞間蛋白質集合は無視できない。いくつかの活性封入体は,6つのSpyTag/Catcher標識蛋白質(CatIBs-STCProtein)の発現において異なる割合で発生した。CatIBs-STCProteinの形成に影響を及ぼす可能性のあるいくつかの因子を議論し,サブユニット量は蛋白質凝集体の形成と強く正相関した。八量体蛋白質ロイシンデヒドロゲナーゼ(LDH)の活性の約85.44%は凝集体で発現し,一方,凝集体における単量体蛋白質緑色蛍光蛋白質(GFP)の活性は12.51%であった。結果は,SpyTag/Catcherが大腸菌で蛋白質凝集体を形成するために使用できることを示した。CatIBs-STCProteinの利点を促進するために,CatIBs-STCLDHを例として,さらにグルタルアルデヒドで架橋して新規架橋酵素凝集体(CLEA-CatIBs-STCLDH)を得た。CLEAs-CatIBs-STCLDHは良好な熱安定性と有機溶媒安定性を有し,その活性は60°C,100分間のインキュベーション後に51.03%を維持した。さらに,架橋CatIBs-STCLDHは従来のCLEAよりも優れた安定性を示し,その活性は10サイクルの触媒作用後に98.70%を維持した。Copyright 2022 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分子構造  ,  酵素の応用関連  ,  遺伝子操作 
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