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J-GLOBAL ID：202202236718018610   整理番号：22A1114284

SARS-CoV-2 nsp5/3CLプロ阻害剤のハイスループット自動スクリーニングのための高感度細胞ベースルシフェラーゼアッセイ【JST・京大機械翻訳】

A highly sensitive cell-based luciferase assay for high-throughput automated screening of SARS-CoV-2 nsp5/3CLpro inhibitors

著者 (17件)： Chen K.Y. (Institut Pasteur, Universite Paris Cite, CNRS UMR3569, Unite Biologie des ARN et Virus Influenza, F-75015 Paris, France) ,  Krischuns T. (Institut Pasteur, Universite Paris Cite, CNRS UMR3569, Unite Biologie des ARN et Virus Influenza, F-75015 Paris, France) ,  Varga L. Ortega (Institut Pasteur, Universite Paris Cite, CNRS UMR3528, Unite de Bioinformatique Structurale, F-75015 Paris, France) ,  Harigua-Souiai E. (Laboratory of Molecular Epidemiology and Experimental Pathology - LR16IPT04, Institut Pasteur de Tunis, Universite de Tunis El Manar, Tunis, Tunisia) ,  Paisant S. (Institut Pasteur, Universite Paris Cite, CNRS UMR3569, Unite Biologie des ARN et Virus Influenza, F-75015 Paris, France) ,  Zettor A. (Institut Pasteur, Universite Paris Cite, CNRS UMR3523, Plateforme de Criblage Chemogenomique et Biologique, F-75015 Paris, France) ,  Chiaravalli J. (Institut Pasteur, Universite Paris Cite, CNRS UMR3523, Plateforme de Criblage Chemogenomique et Biologique, F-75015 Paris, France) ,  Delpal A. (Architecture et Fonction des Macromolecules Biologiques, Aix-Marseille Universite, CNRS UMR7257, F-13009 Marseille, France) ,  Courtney D. (Institut Pasteur, Universite Paris Cite, CNRS UMR3569, Unite Biologie des ARN et Virus Influenza, F-75015 Paris, France) ,  O’Brien A. (Department of Microbiology and Immunology, Loyola University Chicago, Stritch School of Medicine, Maywood, IL, USA) ,  Baker S.C. (Department of Microbiology and Immunology, Loyola University Chicago, Stritch School of Medicine, Maywood, IL, USA) ,  Decroly E. (Architecture et Fonction des Macromolecules Biologiques, Aix-Marseille Universite, CNRS UMR7257, F-13009 Marseille, France) ,  Isel C. (Institut Pasteur, Universite Paris Cite, CNRS UMR3569, Unite Biologie des ARN et Virus Influenza, F-75015 Paris, France) ,  Agou F. (Institut Pasteur, Universite Paris Cite, CNRS UMR3523, Plateforme de Criblage Chemogenomique et Biologique, F-75015 Paris, France) ,  Jacob Y. (Institut Pasteur, Universite Paris Cite, CNRS UMR3569, Unite Genetique Moleculaire des Virus a ARN, F-75015 Paris, France) ,  Blondel A. (Institut Pasteur, Universite Paris Cite, CNRS UMR3528, Unite de Bioinformatique Structurale, F-75015 Paris, France) ,  Naffakh N. (Institut Pasteur, Universite Paris Cite, CNRS UMR3569, Unite Biologie des ARN et Virus Influenza, F-75015 Paris, France)
資料名： Antiviral Research  (Antiviral Research)
巻： 201  ページ： Null  発行年： 2022年 
JST資料番号： D0654B  ISSN： 0166-3542  CODEN： ARSRDR  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： SARS-CoV-2に対する効果的な薬剤は,感染の重症症例および予防的使用の治療に緊急に必要である。主なウイルスプロテアーゼ(nsp5または3CLpro)は,ウイルスライフサイクルに必須であり,ベタコナウイルス間で高度に保存されるため,薬剤開発に対する魅力的で,恐らく広いスペクトル標的である。高感度かつ効率的なハイスループットスクリーニング法は薬物発見の鍵である。ここでは,SARS-CoV-2 nsp5活性をモニターするため,シグナル獲得,高感度細胞に基づくルシフェラーゼアッセイの開発を報告し,384ウェルフォーマットでの化合物のスクリーニングに適していることを示した。小型化と自動化の利点は,スクリーニングが野生型と触媒的に不活性なnsp5と平行して実行でき,アッセイの選択性を改善することである。インハウス化学データベースから14,468化合物セットで分子ドッキングに基づくスクリーニングを行い,359の候補nsp5阻害剤を選択し,実験的に試験した。細胞に基づくアッセイと精製nsp5蛋白質に対するin vitroの両方で抗nsp5活性を示す2分子を同定し,4~8μM範囲のEC_50値でA549-ACE2細胞におけるSARS-CoV-2複製を阻害した。ここで述べたハイスループット適合性アッセイは,SARS-CoV-2 nsp5阻害剤に対する大規模化合物ライブラリーのスクリーニングを可能にするであろう。さらに,このアッセイがウイルスプロテアーゼに依存する他のコロナウイルス及びウイルスに適応できる証拠を示した。Copyright 2022 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 自動化 ,  ライフサイクル ,  *細胞 ,  タンパク質 ,  小型化 ,  ペプチド結合ヒドロラーゼ ,  *スクリーニング ,  野生型 ,  in vitro実験 ,  A549細胞
準シソーラス用語： 化合物ライブラリー ,  *ルシフェラーゼアッセイ ,  創薬 ,  *ハイスループット ,  分子ドッキング , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： SARS-CoV-2 ,  nsp5 ,  3CLpro ,  低分子阻害剤 ,  ハイスループットスクリーニング ,  細胞ベースアッセイ

分類 (2件)： 酵素製剤・酵素阻害剤の基礎研究  (GW21010W) ,  ウイルスの生化学  (EG04030F)

タイトルに関連する用語 (7件)： SARS-CoV-2 ,  阻害剤 ,  ハイスループット ,  スクリーニング ,  高感度 ,  細胞 ,  ルシフェラーゼアッセイ