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J-GLOBAL ID：202202238008932205   整理番号：22A1030209

最適化シグナルペプチド,株および誘導剤によるEscherichia coliにおける高発現可溶性組換抗GFP VHH【JST・京大機械翻訳】

Highly Expressed Soluble Recombinant Anti-GFP VHHs in Escherichia coli via Optimized Signal Peptides, Strains, and Inducers

著者 (19件)： Chao Shuangying (1Medical College, Dalian University, Dalian, China) ,  Chao Shuangying (2DalianKey Laboratory of Oligosaccharide Recombination and Recombinant Protein Modification, Dalian, China) ,  Liu Yuhang (1Medical College, Dalian University, Dalian, China) ,  Liu Yuhang (2DalianKey Laboratory of Oligosaccharide Recombination and Recombinant Protein Modification, Dalian, China) ,  Ding Ning (1Medical College, Dalian University, Dalian, China) ,  Ding Ning (2DalianKey Laboratory of Oligosaccharide Recombination and Recombinant Protein Modification, Dalian, China) ,  Lin Yue (1Medical College, Dalian University, Dalian, China) ,  Lin Yue (2DalianKey Laboratory of Oligosaccharide Recombination and Recombinant Protein Modification, Dalian, China) ,  Wang Qian (1Medical College, Dalian University, Dalian, China) ,  Wang Qian (2DalianKey Laboratory of Oligosaccharide Recombination and Recombinant Protein Modification, Dalian, China) ,  Tan Junwen (1Medical College, Dalian University, Dalian, China) ,  Tan Junwen (2DalianKey Laboratory of Oligosaccharide Recombination and Recombinant Protein Modification, Dalian, China) ,  Li Wei (1Medical College, Dalian University, Dalian, China) ,  Li Wei (2DalianKey Laboratory of Oligosaccharide Recombination and Recombinant Protein Modification, Dalian, China) ,  Zheng Yang (1Medical College, Dalian University, Dalian, China) ,  Zheng Yang (2DalianKey Laboratory of Oligosaccharide Recombination and Recombinant Protein Modification, Dalian, China) ,  Hu Xuejun (1Medical College, Dalian University, Dalian, China) ,  Hu Xuejun (2DalianKey Laboratory of Oligosaccharide Recombination and Recombinant Protein Modification, Dalian, China) ,  Li Junming (3Department of Clinical Laboratory, Yantai Yuhuangding Hospital, Yantai, China)
資料名： Frontiers in Molecular Biosciences (Web)  (Frontiers in Molecular Biosciences (Web))
巻： 9  ページ： 848829  発行年： 2022年 
JST資料番号： U7081A  ISSN： 2296-889X  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： スイス (CHE)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ナノボディ(Nb)としても知られる重鎖抗体(VHH)のH鎖の抗原結合可変ドメインは,イメージング技術,疾患予防,診断および治療において大きな関心事である。可溶性Nbの高レベル発現はその工業生産にとって非常に重要である。本研究では,イソプロピルβ-D-チオガラクトシド(IPTG)誘導および自己誘導を介して,異なる大腸菌株において,それぞれ3つの異なるシグナルペプチド(SP),外膜蛋白質A(OmpA),ペクチン酸リアーゼB(PelB)およびL-アスパラギナーゼII SP(L-AsPII)を有する抗緑色蛍光蛋白質(GFP)VHHの発現系を最適化した。PelBまたはOmpAによる組換え抗GFP VHHsの溶解度は,BL21(DE3)E.coli株におけるIPTG誘導および自己誘導により同じ程度に有意に増強され,標的蛋白質の最大収率は振とうフラスコにおいて約0.4mg/lに達した。組換え抗GFP VHHsの結合活性も,天然ポリアクリルアミドゲル電気泳動(PAGE)によって保持されることが確認された。これらの結果は,OmpAとPelBのようなSPsが,その生物活性を変化させることなく,組換え抗GFP VHH溶解度を効率的に改善でき,可溶性VHHの大腸菌発現系を最適化し,可溶性組換え抗GFP VHHsの工業的生産と,将来における他のVHHの研究の基礎を築くことができることを示唆する。Copyright 2022 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *最適化 ,  溶解度 ,  ニオブ ,  *大腸菌 ,  アスパラギナーゼ ,  抗原 ,  抗体 ,  生物活性 ,  工業生産 ,  重鎖 ,  外膜タンパク質 ,  *シグナルペプチド ,  緑色蛍光タンパク質
準シソーラス用語： OmpA蛋白質 ,  ドメイン構造 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： シグナルペプチド ,  インデューサ ,  大腸菌 ,  抗GFP VHH ,  封入体 ,  可溶性蛋白質

分類 (1件)： 遺伝子発現  (EC02040Q)

引用文献 (43件)：

• BrockmeierU., CaspersM., FreudlR. (2006). Systematic Screening of All Signal Peptides from Bacillus Subtilis: a Powerful Strategy in Optimizing Heterologous Protein Secretion in Gram-Positive Bacteria. J. Mol. Biol. 362 (3), 393-402. doi: 10.1016/j.jmb.2006.07.034
• BurdetteL. A., LeachS. A., WongH. T. (2018). Developing Gram-Negative Bacteria for the Secretion of Heterologous Proteins. Microb. Cel Fact 17 (1), 196. doi: 10.1186/s12934-018-1041-5
• CaoT. B., SaierM. H.Jr. (2003). The General Protein Secretory Pathway: Phylogenetic Analyses Leading to Evolutionary Conclusions. Biochim. Biophys. Acta 1609 (1), 115-125. doi: 10.1016/s0005-2736(02)00662-4
• ChenN., HongF., WangH. (2012). Modified Recombinant Proteins Can Be Exported via the Sec Pathway in Escherichia coli. PloS one 7 (8), e42519. doi: 10.1371/journal.pone.0042519
• ChenR. (2012). Bacterial Expression Systems for Recombinant Protein Production: E. coli and beyond. Biotechnol. Adv. 30 (5), 1102-1107. doi: 10.1016/j.biotechadv.2011.09.013

タイトルに関連する用語 (9件)： 最適化 ,  シグナルペプチド ,  株 ,  誘導 ,  Escherichia ,  発現 ,  可溶性 ,  組換 ,  GFP