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J-GLOBAL ID：202202239811666679   整理番号：22A0998667

CLIP-PCRは血液中のマラリア原虫の雌性配偶体特異的転写産物s25mRNAを直接検出する。【JST・京大機械翻訳】

Direct detection of Plasmodium female gametocyte-specific transcript s25 mRNA in blood by CLIP-P CR

著者 (4件)： Yang Junyuan (中国医学科学院基礎医学研究所 北京協和医学院基礎学院 生物化学与分子生物学系,北京100005) ,  Pian Hongru (中国医学科学院基礎医学研究所 北京協和医学院基礎学院 生物化学与分子生物学系,北京100005) ,  Yang Mingzhu (中国医学科学院基礎医学研究所 北京協和医学院基礎学院 生物化学与分子生物学系,北京100005) ,  Zheng Zhi (中国医学科学院基礎医学研究所 北京協和医学院基礎学院 生物化学与分子生物学系,北京100005)
資料名： Jichuyixue Yulinchuang  (Jichuyixue Yulinchuang)
巻： 42  号： 1  ページ： 139-144  発行年： 2022年 
JST資料番号： C2932A  ISSN： 1001-6325  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:マラリア原虫の雌性配偶体の分子検出方法を確立する。方法:マラリア原虫の雌性配偶体特異的mRNA標的(標的配列)である動合子表面タンパク質(s25)の転写産物に基づき、特異性の捕獲プローブと連結プローブを設計した。血液サンプルが切断により放出されるmRNAsは、核酸抽出を必要とせず、「サンドイッチ」ハイブリダイゼーションにより96穴プレート表面に捕獲される。未結合プローブを洗浄した後、mRNA標的に結合させた連結プローブを連結し、両端を特殊な設計配列とする一本鎖増幅テンプレートを得た。汎用プライマーを用いて、色素法qPCR増幅を行い、あるいは端部にTaqManプローブ配列を設計し、汎用プライマーと汎用TaqManプローブを用いて、プローブ法qPCR増幅を行った。捕獲及び連結増幅に基づく方法(CLIP-PCR)の感度,特異性及び再現性を評価し,通常のRT-qPCR法と比較し,臨床試料の検出に応用した。【結果】CLIP-PCRは,高い感度と特異性を示した。通常のRT-qPCRと同様に,11コピー数までのs25mRNA標的を検出でき,このCLIP-PCR操作はより簡便であった。このCLIP-PCRはマラリア患者の血液中の雌性配偶体を正確に検出できる。96試料の検出時間を3時間に短縮できた。結論:高感度で高効率な染料法と汎用TaqManプローブ法CLIP-PCRによるマラリア原虫の雌性配偶体の検出は、マラリア伝播の制御、配偶子の大規模スクリーニングに基礎を築いた。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 染料 ,  *血液 ,  *mRNA ,  *マラリア ,  *マラリア原虫 ,  捕獲 ,  配偶子 ,  分子ハイブリダイゼーション ,  スクリーニング ,  プライマー【遺伝】 ,  コピー数 ,  定量的PCR法
準シソーラス用語： 高効率 ,  *転写産物 ,  核酸抽出 , 【Automatic Indexing@JST】

分類 (1件)： 感染症・寄生虫症一般  (GD01010H)

タイトルに関連する用語 (4件)： 血液 ,  マラリア原虫 ,  雌性配偶体 ,  転写産物