抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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【目的】HepG2細胞の生物学的挙動に対する遺伝子1b型の異なる準種のC型肝炎ウイルス(HCV)コア蛋白質(core)の影響を調査する。方法:遺伝子1b型HCV癌センター株(T)、癌周囲株(NT)とC191(HCV-J6)のcore組換え真核発現プラスミドを構築し、Lipofectamine2000によりHepG2細胞にトランスフェクションした。それぞれpcEGFP-T群、pcEGFP-NT群、pcEGFP-C191群、対照群と空プラスミド群を設定し、平板クローン法を用いて細胞増殖を測定し、qRT-PCR法を用いて細胞増殖関連遺伝子(PCNA、Ki67)を測定した。CyclinB、CDK1)mNRAの相対レベル。細胞50ng/mLの腫瘍壊死因子-α(TNF-α)を8時間投与し、フローサイトメトリーを用いて細胞アポトーシスを測定し、Westernblot法を用いてアポトーシス関連タンパク質(Bax/Bcl-2、Caspase-3、P<0.05)を測定した。カスパーゼ-9と浸潤関連蛋白質(MMP-3,MMP-9,Snail)の発現を検出した。【結果】pcEGFP-NT群,pcEGFP-T群およびpcEGFP-C191群のHepG2細胞クローン形成率は,それぞれ(57.3±4.2)%,(64.5±3.8)%および(49.8±3.2)%であり,空プラスミド群(44)より有意に高かった。3±3.4%P<アポトーシスは空プラスミド群より著しく弱かった。pcEGFP-NT群のPCNA,Ki67,CyclinBおよびCDK1mNRAの相対レベルは,それぞれ(1.5±0.0),(1.7±0.1),(1.6±0.0)および(1.8±0.1)であり,空プラスミド群よりも有意に高かった[それぞれ(1.P<;pcEGFP-T群のPCNA,Ki67,CyclinBおよびCDK1mNRAの相対レベルは,それぞれ(1.9±0.1),(2.1±0.1),(2.3±0.1)および(2.6±0.1)であり,空プラスミド群(P<)より有意に高かった。0.05)、pcEGFP-C191群は、それぞれ(1.2±0.1)、(1.4±0.0)と(1.5±0.0)で、空プラスミド群(P<)より明らかに高かった。0.05);pcEGFP-NT群、pcEGFP-C191群のBax/Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9タンパク発現量は空プラスミド群より明らかに弱かったが、MMP-3、C191群のBax/Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9タンパク発現量は空プラスミド群より著しく弱かった。MMP-9とSnaiの蛋白質発現は,空のプラスミド群より強かった。結論:HCVcoreタンパク発現量の増強はHepG2細胞の増殖と抗アポトーシス能力を高めることができ、重要な研究意義がある。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】