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J-GLOBAL ID：202202242242968069   整理番号：22A0584291

トランスフェクションCHO細胞におけるポリAの最適化によるトランスジーン発現の増強【JST・京大機械翻訳】

Enhanced Transgene Expression by Optimization of Poly A in Transfected CHO Cells

著者 (7件)： Wang Xiao-yin (1School of Basic Medical Sciences, Xinxiang Medical University, Xinxiang, China) ,  Du Qiu-jie (1School of Basic Medical Sciences, Xinxiang Medical University, Xinxiang, China) ,  Zhang Wei-li (1School of Basic Medical Sciences, Xinxiang Medical University, Xinxiang, China) ,  Xu Dan-hua (1School of Basic Medical Sciences, Xinxiang Medical University, Xinxiang, China) ,  Zhang Xi (2College of Pharmacy, Xinxiang Medical University, Xinxiang, China) ,  Jia Yan-long (2College of Pharmacy, Xinxiang Medical University, Xinxiang, China) ,  Wang Tian-yun (1School of Basic Medical Sciences, Xinxiang Medical University, Xinxiang, China)
資料名： Frontiers in Bioengineering and Biotechnology (Web)  (Frontiers in Bioengineering and Biotechnology (Web))
巻： 10  ページ： 722722  発行年： 2022年 
JST資料番号： U7059A  ISSN： 2296-4185  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： スイス (CHE)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 安定,高レベル組換蛋白質産生細胞株の生成はバイオ医薬品産業において大きな挑戦である。発現ベクター最適化は導入遺伝子発現レベルと安定性を増加させる有効な戦略であり,適切なポリA要素の選択は組換蛋白質の発現に重要である。本研究では,チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞における導入遺伝子発現に対する異なるポリA要素の影響を調べた。ウシ成長ホルモン(BGH),変異体BGH,単純ヘルペスウイルス1型チミジンキナーゼ(HSV-TK),SV40および合成(Synt)ポリAを含む5つのポリA要素を発現ベクターにクローン化し,CHO細胞にトランスフェクトした。結果は,SV40とSyntポリA配列が,安定トランスフェクションCHO細胞でeGFP導入遺伝子発現を有意に改善し,長期発現を維持することを示した。しかし,qPCRの結果は,蛋白質レベルでのeGFP発現が遺伝子コピー数とmRNAレベルに関連しないことを示した。重要なことに,SV40とSyntポリA要素はeGFP導入遺伝子発現の変化を減少させた。さらに,SV40とSyntポリAエレメントはアダリムマブ発現の高いレベルを誘導した。結論として,SV40ポリAとSynt poly Aは,安定な導入遺伝子発現を増加させ,発現の変化を減少させる強い要素であり,適切なポリA要素の選択は,組換蛋白質の発現を改善するのに有用である。Copyright 2022 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *最適化 ,  mRNA ,  遺伝子 ,  卵巣 ,  クローン ,  *ポリAMP ,  遺伝子発現 ,  *トランスフェクション ,  ベクター ,  コピー数 ,  組換タンパク質 ,  *CHO細胞 ,  定量的PCR法
準シソーラス用語： *導入遺伝子 ,  バイオ医薬品 ,  発現ベクター ,  導入遺伝子発現 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： チャイニーズハムスター卵巣細胞 ,  ポリA要素 ,  導入遺伝子発現 ,  安定性 ,  最適化

分類 (2件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

引用文献 (34件)：

• AzzoniA. R., RibeiroS. C., MonteiroG. A., PrazeresD. M. F. (2007). The Impact of Polyadenylation Signals on Plasmid Nuclease-Resistance and Transgene Expression. J. Gene Med. 9 (5), 392-402. doi: 10.1002/jgm.1031
• BayatH., HoseinzadehS., PourmalekiE., AhaniR., RahimpourA. (2018). Evaluation of Different Vector Design Strategies for the Expression of Recombinant Monoclonal Antibody in CHO Cells. Prep. Biochem. Biotechnol. 48 (2), 160-164. doi: 10.1080/10826068.2017.1421966
• ChaiY.-r., GeM.-m., WeiT.-t., JiaY.-l., GuoX., WangT.-y. (2018). Human Rhinovirus Internal Ribosome Entry Site Element Enhances Transgene Expression in Transfected CHO-S Cells. Sci. Rep. 8 (1), 6661. doi: 10.1038/s41598-018-25049-9
• ChenS.-j., WangW., ZhangF.-y., JiaY.-l., WangX.-y., GuoX., et al (2017). A Chimeric HS4 Insulator-Scaffold Attachment Region Enhances Transgene Expression in Transfected Chinese Hamster Ovary Cells. FEBS. Open. Bio. 7 (12), 2021-2030. doi: 10.1002/2211-5463.12335
• DenomeR. M., ColeC. N. (1988). Patterns of Polyadenylation Site Selection in Gene Constructs Containing Multiple Polyadenylation Signals. Mol. Cel. Biol. 8 (11), 4829-4839. doi: 10.1128/mcb.8.11.4829

タイトルに関連する用語 (7件)： トランスフェクション ,  CHO細胞 ,  ポリA ,  最適化 ,  トランスジーン ,  発現 ,  増強