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J-GLOBAL ID：202202243620747572   整理番号：22A1112828

細菌トリプトファニル-tRNAシンテターゼ/tRNA対を用いた大腸菌における非天然アミノ酸変異誘発のためのロバストなプラットフォーム【JST・京大機械翻訳】

A Robust Platform for Unnatural Amino Acid Mutagenesis in E. coli Using the Bacterial Tryptophanyl-tRNA synthetase/tRNA pair

著者 (6件)： Ficaretta Elise D. (Department of Chemistry, Boston College, 2609 Beacon Street, Chestnut Hill, MA 02467, USA) ,  Wrobel Chester J.J. (Department of Chemistry, Boston College, 2609 Beacon Street, Chestnut Hill, MA 02467, USA) ,  Roy Soumya J.S. (Department of Chemistry, Boston College, 2609 Beacon Street, Chestnut Hill, MA 02467, USA) ,  Erickson Sarah B. (Department of Chemistry, Boston College, 2609 Beacon Street, Chestnut Hill, MA 02467, USA) ,  Italia James S. (Department of Chemistry, Boston College, 2609 Beacon Street, Chestnut Hill, MA 02467, USA) ,  Chatterjee Abhishek (Department of Chemistry, Boston College, 2609 Beacon Street, Chestnut Hill, MA 02467, USA)
資料名： Journal of Molecular Biology  (Journal of Molecular Biology)
巻： 434  号： 8  ページ： Null  発行年： 2022年 
JST資料番号： D0124B  ISSN： 0022-2836  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： BL21(DE3)株から誘導される堅牢なユーザーフレンドリー大腸菌(E.coli)発現系の開発を,遺伝子操作大腸菌トリプトファン-tRNAシンテターゼ(EcTrpRS)-tRNATrp対を用いて,部位特異的に非天然アミノ酸(UAAs)を蛋白質に組み込むために報告した。これは,Saccharomyces cerevisiaeの直交対応物とBL21(DE3)E.coliの内因性EcTrpRS-tRNATrp対を機能的に置換することにより可能となり,直交ナンセンスサプレッサーとして,結果として変化した翻訳機構トリプトファン(ATMW-BL21)E.coli株に再導入する。得られた発現系は,発現宿主としてのBL21(DE3)の好ましい特性から恩恵を受け,広く使用されたT7駆動組換え発現系と互換性がある。さらに,ナンセンス抑制遺伝子操作EcTrpRS-tRNATrp対を発現するベクターを系統的に最適化し,種々のトリプトファン類似体の取込み効率を有意に増強した。まとめると,改良菌株と最適化サプレッサープラスミドは,いくつかの異なる蛋白質への効率的なUAA取り込み(野生型レベルの65%まで)を可能にする。このロバストでユーザフレンドリーなプラットフォームは,遺伝的にコードされたトリプトファン由来UAAsの範囲を大きく広げるであろう。Copyright 2022 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 最適化 ,  *大腸菌 ,  *tRNA ,  遺伝 ,  タンパク質 ,  *変異誘発 ,  翻訳【遺伝】 ,  遺伝子操作 ,  直交性 ,  *ロバスト性 ,  野生型 ,  ベクター ,  *合成酵素 ,  アミノ酸 ,  窒素複素環化合物 ,  芳香族縮合化合物 ,  第一アミン
準シソーラス用語： *非天然アミノ酸 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (3件)： BL21(DE3) ,  遺伝コード展開 ,  トリプトファン

分類 (2件)： 生物学的機能  (EB03040U) ,  蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N)

物質索引 (1件)： トリプトファン

タイトルに関連する用語 (8件)： 細菌 ,  tRNA ,  シンテターゼ ,  大腸菌 ,  非天然アミノ酸 ,  変異誘発 ,  ロバスト ,  プラットフォーム