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J-GLOBAL ID:202202247250809541   整理番号:22A0727909

短い相同性アームを用いた多重ゲノム統合のためのPichia pastorisにおける相同組換効率の増強【JST・京大機械翻訳】

Enhancing Homologous Recombination Efficiency in Pichia pastoris for Multiplex Genome Integration Using Short Homology Arms
著者 (9件):
資料名:
巻: 11  号:ページ: 547-553  発行年: 2022年 
JST資料番号: W5048A  ISSN: 2161-5063  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 短報  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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燃料,化学物質,および天然物を生産するための微生物細胞工場としてのメチロトローフ酵母Pichia pastorisの確立への関心が高まり,特に原料としてメタノールを用いる。CRISPR(Clustered regularly Interspaced Short Paindrometic Researchs)に基づくゲノム編集技術は,多遺伝子生合成経路の統合のために確立されているが,長い(500~1000bp)相同性腕は,おそらくP.pastorisにおける低い相同組換え(HR)効率により,一般的に必要とされる。短い相同性アームを持つ異種遺伝子の効率的なゲノム統合を達成するために,Saccharomyces cerevisiaeから組換機構を導入することによってHR効率を高めることを目的とした。最初に,RAD52,RAD59,MRE11およびSAE2を含むHR関連遺伝子を過剰発現させ,ゲノム統合効率に及ぼすそれらの影響を評価した。次に,HR効率増強P.pastorisを構築し,それは,それぞれ100%,~98%,および~81%の高い効率で,~40bpの相同性アームを持つ異種遺伝子発現カセットの単一,2,および3遺伝子座の統合を可能にした。最後に,β-カロチン生産菌株の構築と一段階でのベタキサンチン生産菌株の最適化を示した。HR効率増強P.pastoris株は,堅牢な細胞工場の構築に使用可能であり,著者らの機械工学戦略は,他の非従来型酵母の修飾に採用できる。Copyright 2022 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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遺伝子発現  ,  遺伝子操作 
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