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J-GLOBAL ID：202202255156956776   整理番号：22A1023950

哺乳類発現系を用いたヒトグランザイムA/Bおよびグラニュリシンの精製の改善【JST・京大機械翻訳】

Improved Purification of Human Granzyme A/B and Granulysin Using a Mammalian Expression System

著者 (11件)： Rasi Valerio (1Department of Molecular Microbiology and Immunology, Saint Louis University School of Medicine, Saint Louis, MO, United States) ,  Rasi Valerio (2Department of Internal Medicine, Division of Infectious Diseases, Allergy and Immunology, Saint Louis University School of Medicine, Saint Louis, MO, United States) ,  Hameed Owais Abdul (3Anatomy Unit, Department of Oncology, Microbiology and Immunology, Faculty of Science and Medicine, University of Fribourg, Fribourg, Switzerland) ,  Hameed Owais Abdul (4Department of Chemistry, Faculty of Science and Medicine, University of Fribourg, Fribourg, Switzerland) ,  Matthey Patricia (3Anatomy Unit, Department of Oncology, Microbiology and Immunology, Faculty of Science and Medicine, University of Fribourg, Fribourg, Switzerland) ,  Bera Sibes (1Department of Molecular Microbiology and Immunology, Saint Louis University School of Medicine, Saint Louis, MO, United States) ,  Grandgenett Duane P. (1Department of Molecular Microbiology and Immunology, Saint Louis University School of Medicine, Saint Louis, MO, United States) ,  Salentinig Stefan (4Department of Chemistry, Faculty of Science and Medicine, University of Fribourg, Fribourg, Switzerland) ,  Walch Michael (3Anatomy Unit, Department of Oncology, Microbiology and Immunology, Faculty of Science and Medicine, University of Fribourg, Fribourg, Switzerland) ,  Hoft Daniel F. (1Department of Molecular Microbiology and Immunology, Saint Louis University School of Medicine, Saint Louis, MO, United States) ,  Hoft Daniel F. (2Department of Internal Medicine, Division of Infectious Diseases, Allergy and Immunology, Saint Louis University School of Medicine, Saint Louis, MO, United States)
資料名： Frontiers in Immunology (Web)  (Frontiers in Immunology (Web))
巻： 13  ページ： 830290  発行年： 2022年 
JST資料番号： U7074A  ISSN： 1664-3224  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： スイス (CHE)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 細胞毒性リンパ球放出蛋白質は,感染または腫瘍標的細胞の認識後に細胞質細胞溶解顆粒内に含まれた。これらの細胞毒性顆粒蛋白質(すなわち,グランザイム,グラニュリシンおよびパーフォリン)は,ヒト細胞免疫内の重要な免疫学的メディエーターである。高度に精製した細胞毒性蛋白質の利用性は,敗血症および自己免疫における免疫および機構的関与におけるそれらの機能を理解するための基礎である。天然細胞毒性蛋白質の回収のための方法は,問題となる。1)付加的蛋白質の共精製,機能の交絡解釈,及び2)高精製蛋白質の低収率。個々の細胞溶解成分の組換蛋白質発現はこれらの課題を克服することができる。哺乳類発現系の使用は,最適な翻訳後修飾とエンドトキシン汚染の回避のために好ましい。これらの蛋白質のいくつかは,宿主有向ヒト治療(例えば,グランザイムA),またはグラニュリシンにおける全身感染または腫瘍の治療のために提案されている。ここでは,ヒトグランザイム(グランザイムAおよびグランザイムB)の高収率のコスト効率の高い精製のためのHEK293T細胞を用いた新しい発現系と,以前の報告より生物活性が増強されたグラニュリシンを報告する。得られた蛋白質は天然汚染物がなく,正しく折畳まれ,酵素的に活性であった。重要なことに,これらの改良は,哺乳類系から高収率で生物学的に活性な組換えヒトグラニュリシンの最初の精製をもたらした。この方法は多くの他の分泌細胞蛋白質の精製のためのテンプレートとして使用でき,ヒト医学の進歩につながる可能性がある。Copyright 2022 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 腫瘍 ,  タンパク質 ,  内毒素 ,  ヒト ,  *哺乳類 ,  リンパ球 ,  自己免疫 ,  生物活性 ,  細胞生理 ,  細胞性免疫 ,  敗血症 ,  細胞毒性 ,  パーフォリン
準シソーラス用語： *グランザイム ,  *グラヌリシン ,  細胞溶解 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (8件)： グランザイムA ,  グランザイムB ,  グラニュリシン ,  細胞毒性顆粒蛋白質 ,  哺乳類発現 ,  HEK293T ,  等張バッファ ,  リポフェクタミン3000

分類 (3件)： 細胞生理一般  (EF02010S) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  酵素一般  (EB09010D)

引用文献 (53件)：

• Stenger S, Hanson DA, Teitlbaum R, Dewan P, Niazi KR, Froelich CJ, et al. An Antimicrobial Activity of Cytolytic T Cells Mediated by Granulysin. Science (1998) 282:121-5. doi: doi: 10.1126/science.282.5386.121
• Pardo J, Aguilo JI, Anel A, Martin P, Joeckel L, Borner C, et al. The Biology of Cytotoxic Cell Granule Exocytosis Pathway: Granzymes Have Evolved to Induce Cell Death and Inflammation. Microbes Infect (2009) 11:452-9. doi: doi: 10.1016/j.micinf.2009.02.004
• Kaiserman D, Bird CH, Sun J, Matthews A, Ung K, Whisstock JC, et al. The Major Human and Mouse Granzymes are Structurally and Functionally Divergent. J Cell Biol (2006) 175:619-30. doi: doi: 10.1083/jcb.200606073
• Boivin WA, Cooper DM, Hiebert PR, Granville DJ. Intracellular Versus Extracellular Granzyme B in Immunity and Disease: Challenging the Dogma. Lab Invest (2009) 89:1195-220. doi: doi: 10.1038/labinvest.2009.91
• Elavazhagan S, Fatehchand K, Santhanam V, Fang H, Ren L, Gautam S, et al. Granzyme B Expression is Enhanced in Human Monocytes by TLR8 Agonists and Contributes to Antibody-Dependent Cellular Cytotoxicity. J Immunol (2015) 194:2786-95. doi: doi: 10.4049/jimmunol.1402316

タイトルに関連する用語 (6件)： 哺乳類 ,  発現 ,  ヒト ,  グランザイムA ,  グラニュリシン ,  精製