成熟マウス卵における有毛細胞の半自動化定量化【JST・京大機械翻訳】

Sung Cathy Yea Won; Barzik Melanie; Costain Tucker; Wang Lizhen; Cunningham Lisa L.

文献

J-GLOBAL ID：202202257424837957 整理番号：22A0797556

成熟マウス卵における有毛細胞の半自動化定量化【JST・京大機械翻訳】

Semi-automated quantification of hair cells in the mature mouse utricle

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資料名：
巻： 416 ページ： Null 発行年： 2022年
JST資料番号： E0235C ISSN： 0378-5955 CODEN： HERED3 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：オランダ (NLD) 言語：英語 (EN)

マウスウトリクルモデル系は,成熟哺乳類有毛細胞(HC)の研究のための最良特性化ex vivo調製である。このモデル系の多くの利点にもかかわらず,培養 uからのHCの効率的で信頼できる定量は,このモデルシステムによる持続的挑戦である。Utricular HCは,utricleの画像上に置かれた関心領域(ROIs)の免疫標識HCsの計数により一般的に定量される。著者らのデータは,この方法を用いて得たHC数の精度が,ユートリクルの異なる地域にわたるHC密度の変動性によって影響を受けることを示した。さらに,一般的に使用されるHCマーカーミオシン7aは,自動定量に役立たない拡散細胞質染色をもたらし,労働集約的タスクである手動で定量しなければならない。さらに,ミオシン7a免疫反応性は死亡HCにおいて保持され,このマーカーを用いて生きたHCの不正確な定量をもたらす。ここでは,アポトーシスHCを検出する活性化カスパーゼ3/7(AC3/7)の標識とHC特異的転写因子Pou4f3に対する免疫反応性を組み合わせた生存HCの半自動定量法を開発した。離散核Pou4f3シグナルは,HC定量を自動化するためにImageJ内の二値または閾値関数の利用を可能にした。このプロセスをさらに流線するために,精度のために直ちに評価できる最終定量化画像に生画像負荷からプロセスを自動化するImageJマクロを作成した。この定量化された画像の中で,ユーザは画像オーバーレイを介して定量化を手動で補正し,計数HC核を示す。AC3/7を発現するPou4f3陽性HCは,生存するHCの正確な数を生じるために減算される。全体として,手動HC定量よりも高速であり,高精度で生存するHCを同定する半自動化法を示した。Copyright 2022 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

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発生と分化 , 細胞生理一般 , 生物学的機能

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