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J-GLOBAL ID：202202263150462104   整理番号：22A0987706

海倫脳炎微胞子虫分泌タンパク質EhPTP4による宿主小胞体蛋白分解経路の調節作用【JST・京大機械翻訳】

Microsporidian Encephalitozoon hellem secretes EhPTP4 to regulate host endoplasmic reticulum-associated degradation

著者 (8件)： Han Yinze (西南大学家蚕基因組生物学国家重点実験室,重慶400715;西南大学微bao子虫感染与防控重慶市重点実験室,重慶400715) ,  Gao Hailong (西南大学家蚕基因組生物学国家重点実験室,重慶400715;西南大学微bao子虫感染与防控重慶市重点実験室,重慶400715) ,  Xu Jinzhi (西南大学家蚕基因組生物学国家重点実験室,重慶400715;西南大学微bao子虫感染与防控重慶市重点実験室,重慶400715) ,  Luo Jian (西南大学家蚕基因組生物学国家重点実験室,重慶400715;西南大学微bao子虫感染与防控重慶市重点実験室,重慶400715) ,  Chen Jiajing (西南大学家蚕基因組生物学国家重点実験室,重慶400715;西南大学微bao子虫感染与防控重慶市重点実験室,重慶400715) ,  Han Bing (山東大学基礎医学院,山東済南250100) ,  Li Tian (西南大学家蚕基因組生物学国家重点実験室,重慶400715;西南大学微bao子虫感染与防控重慶市重点実験室,重慶400715) ,  Zhou Zeyang (西南大学家蚕基因組生物学国家重点実験室,重慶400715;西南大学微bao子虫感染与防控重慶市重点実験室,重慶400715;重慶師范大学生命科学学院,重慶400047)
資料名： Weishengwu Xuebao  (Weishengwu Xuebao)
巻： 62  号： 1  ページ： 357-373  発行年： 2022年 
JST資料番号： C2382A  ISSN： 0001-6209  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】微胞子虫は,ヒトとほとんどの動物に感染する一種の特異的細胞内寄生性病原微生物である。本課題は、海倫脳炎の微胞子虫(Encephalitozoonhellem)を研究対象とし、その極管タンパク質4(EhPTP4)を一つの潜在的な分泌性毒力因子として、宿主細胞内の定位と機能を検討する。[方法]EhPTP4のマウス由来ポリクローナル抗体を作製し、間接免疫蛍光分析及びWesternblottingを用いて、感染細胞におけるEhPTP4の細胞内局在を決定した。配列特徴に基づいて,HEK293細胞において野生型と変異体EhPTP4をトランスフェクションし,その局在と病原増殖に対する作用を分析した。EhPTP4に形質移入したHEK293細胞をRNA-seqで配列し,EhPTP4による宿主遺伝子発現と経路の変化を分析した。さらに、RNAiと細胞トランスフェクションにより、差次的発現遺伝子の制御作用を分析し、RT-qPCRとWesternblottingを用いて、制御効果を検証した。[結果]EhPTP4のN末端にはシグナルペプチドがあり、C末端にはヒスチジンに富むドメイン(HRD)と核定位シグナル配列(NLS)がある。蛋白質局在分析は,EhPTP4が感染とトランスフェクション細胞において宿主核に分泌されることを示した。HEK293細胞におけるEhPTP4の過剰発現は,病原体の増殖を有意に促進した。RNA-seqと蛋白質ユビキチン化分析で、EhPTP4は宿主小胞体蛋白分解経路(endoplasmicreticulum-associateddegradation)を顕著にアップレギュレーションした。ERADのキー遺伝子(PDIA4、HERP、HSPA5とDerlin3)の発現と宿主タンパクのユビキチン化修飾は、EhPTP4が宿主の小胞体タンパク質分解を制御する機能を有することを表明した。HEK293細胞でPDIA4を過剰発現すると、タンパク質ユビキチン化修飾が明らかに上方制御され、RNA干渉PDIA44はHERP遺伝子発現のダウンレギュレーションを引き起こし、PDIA4が病原制御宿主ERAD過程において、重要な作用を発揮していることが明らかになった。さらに、EhPTP4のHRDに対して欠失突然変異(EhPTP4ΔHRD)を行い、細胞へトランスフェクションし、この欠失突然変異体がPDIA4とHERPの発現を顕著にアップレギュレーションしないことを発見した、HRDがEhPTP4の毒力機能に肝心な作用を発揮することが分かった。[結論]初めて、微胞子虫が分泌タンパク質を利用して宿主のERADとタンパクのユビキチン化を調節し、この病原の発病機序を深く解析するために重要な参考を提供した。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 遺伝子 ,  細胞 ,  *宿主 ,  ヒト ,  *胞子虫類 ,  マウス ,  感染 ,  *分泌 ,  欠失突然変異 ,  遺伝子発現 ,  トランスフェクション ,  アップレギュレーション ,  ユビキチン化
準シソーラス用語： 小胞体関連分解 ,  過剰発現 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： microsporidia ,  Encephalitozoon hellem ,  EhPTP4 ,  secreted protein ,  ERAD ,  ubiquitination

分類 (1件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (9件)： 海 ,  脳炎 ,  胞子虫 ,  分泌タンパク質 ,  宿主 ,  小胞体 ,  蛋白分解 ,  経路 ,  調節