抄録/ポイント:
抄録/ポイント
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【目的】鼻咽頭癌細胞CNE2の放射線感受性に及ぼすBmi-1発現の影響を調査する。方法:リアルタイム蛍光定量PCR(qRT-PCR)とWesternblottingにより、4種類の鼻咽頭癌細胞株CNE1、CNE2、HNE1とHONE1におけるBmi-1の発現を測定し、Bmi-1を高発現する細胞株をスクリーニングした。Bmi-1mRNAに対する3つの干渉配列(shRNA1,shRNA2,shRNA3)を設計し,レンチウイルス組換ベクターBmi-1-shRNA1,Bmi-1-shRNA2,Bmi-1-shRNA3の構築に用いた。Bmi-1を過剰発現する細胞株にトランスフェクションし、Bmi-1をノックダウンする最適なレンチウイルス組み換えベクターを選別した。選別したレンチウイルス組み換えベクターをBmi-1を高発現する鼻咽頭癌細胞株にトランスフェクションし、2Gy放射線(IR)を用いて照射を行い、平板クローン形成実験により細胞増殖状況を測定し、フローサイトメトリーで細胞周期分布及びアポトーシス状況を測定した。結果:4種類の鼻咽頭癌細胞株において、CNE2細胞のBmi-1mRNA発現レベルが最も高く(P<0.05)、CNE1、CNE2細胞におけるBmi-1タンパク質の発現が比較的高い(P<0.05)。Bmi-1-shRNA1,Bmi-1-shR-NA2,Bmi-1-shRNA3は,Bmi-1発現を減少させ,Bmi-1-shRNA3群は,Bmi-1-shRNA3群で最低(P<0.05)であった。放射線照射を受けた後、対照群(Bmi-1-NC+IR)と比べ、トランスフェクション群(Bmi-1-shRNA3+IR)の細胞増殖能力は「クローン細胞数」を弱めた。(130.67±12.01)vs.(61.00±8.19)個,アポトーシス率は(13.40±0.66)%vs.(22.67±1.25)%],G2/M期細胞の割合は(16.18±1.43)%vs増加した。(22.34±2.00)%](P>0.05)。0.05)。【結論】Bmi-1のノックダウンはNPCCNE2細胞の放射線感受性を向上させる。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】