抄録/ポイント：
抄録/ポイント
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【目的】非小細胞肺癌(NSCLC)細胞の放射線感受性に及ぼすグリチルリチンの効果と機構を調査する。【方法】A549細胞をinvitroで培養した。異なる濃度のグリチルリチン処理を用いて、20%抑制濃度(IC20)のグリチルリチン濃度をスクリーニングした。グリチルリチン処理後、クローン形成実験にて細胞放射線治療の敏感性を観察し、半数の細胞生存率(SF)の相応する放射線量を選択し、後続の実験を行った。A549細胞は,対照群,リキリチゲニン群,miR-21mics-NC群,miR-21mics群,グリチルリチン+miR-21mics群にランダムに分けられた。miR-21mics-NC群をmiR-21模倣体陰性対照にトランスフェクトし,miR-21mics群,グリチルリチゲニン+miR-21mics群をmiR-21模倣体に形質移入し,24h後にトランスフェクション効果を観察し,グリチルリチン群;グリチルリチン+miR-21mics群には,0.2mmol/Lのリキリチゲニンを24時間,4Gyの6MV-X線を3時間照射した。細胞生存率を,細胞計数キット8(CCK-8)で測定した。細胞アポトーシスをフローサイトメトリーにより検出した。定量的ポリメラーゼ連鎖反応(qPCR)を用いて,miR-21と蛋白質チロシンホスファターゼMEG2mRNAの相対的発現を検出した。miR-21とMEG2の標的関係は,二重ルシフェラーゼレポーター遺伝子実験によって確認した。ウエスタンブロット法(ウエスタンブロット)を用いてMEG2蛋白質の発現を検出した。[結果]グリチルリチン濃度0.2mmol/L、グリチルリチン処理後、A549細胞SF低下(P<0.05)、放射線増感比>1。対照群と比べ、グリチルリチン群の細胞相対活力、miR-21相対発現量は低下し、アポトーシス率、MEG2mRNAと蛋白相対発現量は上昇(P<0.05)、miR-21mics群の細胞相対活力、miR-21相対発現量が増加し、アポトーシス率、MEG2mRNAと蛋白相対発現量が低下した(P<0.05);グリチルリチン群と比較して、miR-21mics群、グリチルリチン+miR-21mics群の細胞相対活力、miR-21相対発現量が増加し、アポトーシス率、MEG2mRNAと蛋白相対発現量が低下した(P<0.05);miR-21mics-NC群と比較して,miR-21mics群の細胞生存度,miR-21相対発現量,アポトーシス率,MEG2mRNAおよび蛋白質発現は,減少した(P<0.05)。0.05);miR-21mics群と比較して、グリチルリチン+miR-21mics群の細胞相対活力、miR-21相対発現量が低下し、アポトーシス率、MEG2mRNAと蛋白相対発現量が上昇した(P<0.05)。二重ルシフェラーゼレポーター遺伝子実験の結果,miR-21はMEG2を直接標的とした。[結論]グリチルリチンはNSCLC細胞の増殖を抑制し、細胞アポトーシスを促進し、放射線治療の感受性を高めることができ、その機序はmiR-21のMEG2転写と翻訳の抑制に関与している可能性がある。Data from Wanfang. Translated by JST.【JST・京大機械翻訳】
