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J-GLOBAL ID:202202263755909675   整理番号:22A0448832

蛍光分析法によるCupriavidus necator中のポリ(3-ヒドロキシブチラート)とバイオマスのin situ定量【JST・京大機械翻訳】

In situ quantification of poly(3-hydroxybutyrate) and biomass in Cupriavidus necator by a fluorescence spectroscopic assay
著者 (3件):
資料名:
巻: 106  号:ページ: 635-645  発行年: 2022年 
JST資料番号: H0764A  ISSN: 0175-7598  CODEN: EJABDD  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: ドイツ (DEU)  言語: 英語 (EN)
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蛍光分光法は,生分解性ポリエステルクラスポリヒドロキシアルカノエートに属する生分解性高分子であるポリ(3-ヒドロキシ酪酸)(PHB)形成をモニターするための安価で簡単で迅速なアプローチを提供する。本研究では,蛍光および側面散乱に基づく分光セットアップを開発し,in situバイオマスおよびバイオテクノロジー適用Cupriavidus necator株のPHB形成をモニターした。C.necatorのPHB定量を確立するために,染料2,2-ジフルオロ-4,6,8,10,12-ペンタメチル-3-アザ-1-アゾニア-2-boranuidatricyclo[7.3.0.03,7]ドデカ-1(12),4,6,8,10-ペンタエン(BODIPY493/503),エチル5-メトキシ-1,2-ビス(3-メチル-2-ブテニル)-3-オキソインドール-2-カルボキシラート(LipidGreen2),および9-(ジエチルアミノ)ベンゾ[a]フェノキサジン-5-オン(ナイルレッド))を互いに比較した。蛍光染色有効性を,3D励起発光マトリックスと実験計画法を通して得た。決定係数は,すべての3つの染料で≧0.98であり,高圧液体クロマトグラフィーに線形で,PHB含有量,およびバイオマス濃度への側面散乱を得た。蛍光相関モデルは,バイオマス関連サイド散乱の取り込みによってさらに改善された。その後,得られた回帰蛍光モデルを,窒素欠乏,蛍光体欠乏,およびNaClストレスC.necator培養に首尾よく適用した。回帰モデルの最高移動性は,脂質Green2を用いて示した。新しい方法は,発酵中の重要な生物工学的パラメータバイオマスとPHB含有量の迅速かつ同時検出のためのテーラーメイド方法を開く。キーポイント:蛍光染色条件及び3D励起発光マトリックス(PHB)を用いたPHB及びバイオマスの細胞内定量は,脂質グリーン2により最良に得られ,次いでBODIPDY493/503及びナイルレッドであった。グラフ抽象;Copyright The Author(s) 2022 Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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代謝と栄養  ,  遺伝子操作 
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