文献

J-GLOBAL ID：202202265380112706   整理番号：22A0701899

標的化配列決定によるCHO生産細胞株におけるランダム導入遺伝子統合の構造解析【JST・京大機械翻訳】

Structural analysis of random transgene integration in CHO manufacturing cell lines by targeted sequencing

著者 (8件)： Stadermann Anna (Bioprocess Development Biologicals, Cell Line Development, Boehringer Ingelheim GmbH & Co. KG, Biberach, Germany) ,  Gamer Martin (R&D Project Management NBEs, Boehringer Ingelheim GmbH & Co. KG, Biberach, Germany) ,  Fieder Juergen (Bioprocess Development Biologicals, Cell Line Development, Boehringer Ingelheim GmbH & Co. KG, Biberach, Germany) ,  Lindner Benjamin (Bioprocess Development Biologicals, Cell Line Development, Boehringer Ingelheim GmbH & Co. KG, Biberach, Germany) ,  Fehrmann Steffen (Genedata AG, Selector BU, Basel, Switzerland) ,  Schmidt Moritz (Bioprocess Development Biologicals, Cell Line Development, Boehringer Ingelheim GmbH & Co. KG, Biberach, Germany) ,  Schulz Patrick (Bioprocess Development Biologicals, Cell Line Development, Boehringer Ingelheim GmbH & Co. KG, Biberach, Germany) ,  Gorr Ingo H. (Analytical Development Biologicals, Boehringer Ingelheim GmbH & Co. KG, Biberach, Germany)
資料名： Biotechnology and Bioengineering  (Biotechnology and Bioengineering)
巻： 119  号： 3  ページ： 868-880  発行年： 2022年 
JST資料番号： D0019A  ISSN： 0006-3592  CODEN： BIBIAU  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 遺伝的に修飾したCHO細胞株は生物医薬品の生産に伝統的に使用されている。しかし,医薬品製造細胞株のゲノムへの導入遺伝子統合の機構と正確な位置の詳細な分子理解はまだ不足している。次世代シークエンシング(NGS)は,細胞遺伝子型解析のための強力で手頃な技術に成熟しているので,CHO細胞工場の理解を強く促進するための大きな有望性を有する。NGSと組み合わせた標的化Locus Amplification(TLA)は,発現ベクターの安定な統合で生じる導入遺伝子統合と構造ゲノム変化のゲノム位置の頑健な検出を可能にする。TLAを適用して,異なるモノクローナル抗体を発現するいくつかのCHO産生細胞株の比較ゲノムフィンガープリントを作成した。さらに,既存の細胞系(超トランスフェクション)のトランスフェクションの付加的ラウンドから生じる高い生産者を分析し,統合部位の統合性と数を調べた。本解析は,宿主細胞のゲノムの統合と構造変化の数に関して,統合領域の詳細な遺伝的特性化を可能にした。連結導入遺伝子コピーを持つクローン当たりの単一統合部位を検出し,ゲノム再配列,欠失または転座と関連することを見出した。スーパートランスフェクションはクローン当たりの付加的統合部位に関連した力価の増加をもたらした。TLAフィンガープリントに基づいて,同じ母クローンに由来するCHO細胞株は明らかに識別できた。興味深いことに,同じ母クローンに由来する2つのCHO細胞株は,それらの同一のTLAフィンガープリントにもかかわらず,遺伝的および表現型的に異なることが示された。まとめると,TLAは従来法と比較して導入遺伝子統合部位に関して正確な遺伝的特性化を提供し,細胞株発生におけるCHO産生クローンの総合評価のための貴重なツールを示す。Copyright 2022 Wiley Publishing Japan K.K. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： *構造解析 ,  *遺伝 ,  *細胞 ,  表現型 ,  ゲノム ,  *培養細胞 ,  指紋 ,  クローン ,  転座 ,  トランスフェクション ,  モノクローナル抗体 ,  *ターゲティング ,  CHO細胞
準シソーラス用語： *細胞株 ,  *導入遺伝子 ,  次世代シークエンシング , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (6件)： CHO ,  クローン性 ,  初期段階の細胞株発生 ,  次世代シークエンシング ,  超トランスフェクション ,  標的遺伝子座増幅

分類 (2件)： 動物の生化学  (EJ01050P) ,  抗原・抗体・補体の生産と応用  (ED04030W)

タイトルに関連する用語 (5件)： 標的化 ,  細胞株 ,  導入遺伝子 ,  統合 ,  構造解析