多環フェノールの位置特異的ヒドロキシル化のための遺伝子操作細菌フラビン依存性モノオキシゲナーゼ【JST・京大機械翻訳】

Herrmann Susann; Dippe Martin; Pecher Pascal; Funke Evelyn; Pietzsch Markus; Wessjohann Ludger A.

文献

J-GLOBAL ID：202202266149967775 整理番号：22A0982740

多環フェノールの位置特異的ヒドロキシル化のための遺伝子操作細菌フラビン依存性モノオキシゲナーゼ【JST・京大機械翻訳】

Engineered Bacterial Flavin-Dependent Monooxygenases for the Regiospecific Hydroxylation of Polycyclic Phenols

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巻： 23 号： 6 ページ： e202100480 発行年： 2022年
JST資料番号： W1258A ISSN： 1439-4227 CODEN： CBCHFX 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：アメリカ合衆国 (USA) 言語：英語 (EN)

モノフェノールのカテコールへのヒドロキシル化を触媒するE.coli由来のフラビン依存性モノオキシゲナーゼである4-ヒドロキシフェニルアセタート3-ヒドロキシラーゼ(4HPA3H)を,より嵩高い基質,特にフェニルプロパノイド類,フラボン類またはクマリン類のようなフェノール性天然物に変換するための合理的な再設計によって修飾した。4HPA3Hの結合ポケットにおける選択したアミノ酸位置は,Pseudomonas aeruginosa由来の相同蛋白質からの残基と交換され,フラボノイドナリンゲニンまたはアルカロイド模倣2-ヒドロキシカルバゾールのような spな基質の転換が改善された変異体を生じた。反応に続いて,生成物に選択的Fe(III)-カテコール発色アッセイを行った。特に残基Y301の置換は基質特異性の調節を促進した:非芳香族性であるが疎水性(イソ)ロイシンの導入は,基質フェルラ酸(グアイアシル(グアヤシル)部分,バニロイドモチーフの一部)を非置換モノフェノールに優先させた。4HPA3Hおよびその最適化変異体による基質のin vivo(ホールセル生体触媒)およびin vitro(3酵素カスケード)形質転換は,厳密に位置特異的であり,副産物の生成なしで進行した。Copyright 2022 Wiley Publishing Japan K.K. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

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酵素一般

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