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J-GLOBAL ID:202202266780228182   整理番号:22A0972147

I型Cas3ヌクレアーゼの金属依存性と機能多様性【JST・京大機械翻訳】

Metal Dependence and Functional Diversity of Type I Cas3 Nucleases
著者 (5件):
資料名:
巻: 61  号:ページ: 327-338  発行年: 2022年 
JST資料番号: B0270B  ISSN: 0006-2960  CODEN: BICHAW  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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タイプI CRISPR-Casシステムは,外来DNAを切断することによって寄生遺伝要素から保護する原核生物を提供する。さらに,それらは病原性と病原性を調節することにより細菌生理学に影響を与え,適応性と進化において鍵となるプレーヤーとなる。シグネチャヌクレアーゼCas3はHDドメインメタロ蛋白質スーパーファミリーに属するホスホジエステラーゼである。特異的金属取り込みを指示することにより,(Tf)からCas3に対する無差金属イオン補因子プロファイルをマッピングした。Tf Cas3は,4つのホモジ金属中心(Fe2+,Co2+,Mn2+,およびNi2+)を有する有意なssDNA開裂を与えるが,ジ鉄型は,最も活性であり,おそらくin vivoで生物学的に関連している。Electron常磁性共鳴(EPR)分光法とメスバウアー分光法は,ジ鉄補因子が3つのレドックス型をアクセスできるが,ジ鉄型は穏やかな還元剤で容易に得られることを示した。さらに,Cas3′′酵素が二核補因子を保有し,以前には確認されていないことを確立するために,Fe濃縮蛋白質にEPRとMoessbauerを使用した。補助Hisリガンドは効率的なssDNA開裂に重要であるが,ジ鉄集合または小分子加水分解には重要でないことを示した。さらに,環状モノヌクレオチドを加水分解するCas3の能力を調べ,Tf Cas3が,RNA3′末端で2′3′-環状ホスホジエステル結合を加水分解するHDドメイン蛋白質である保存毒性因子A(CvfA)に匹敵する触媒効率で2′3′-cAMPを加水分解することを示した。このCvfA活性は毒性調節にリンクするので,Cas3は毒性を制御する可能な分子経路として2′3′-cAMP加水分解を利用する可能性がある。Copyright 2022 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
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酵素一般  ,  光合成 
タイトルに関連する用語 (3件):
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