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J-GLOBAL ID:202202270391479375   整理番号:22A0925995

ヒラメ(Paralichthys olivaceus)における栄養要求性Edwardsiella piscicida突然変異体のCRISPR/Cas9仲介発生と免疫化【JST・京大機械翻訳】

CRISPR/Cas9-mediated generation of auxotrophic Edwardsiella piscicida mutants and immunization in olive flounder (Paralichthys olivaceus)
著者 (3件):
資料名:
巻: 122  ページ: 98-105  発行年: 2022年 
JST資料番号: W1617A  ISSN: 1050-4648  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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Edwardsiella piscicidaは養殖魚における大量死亡率の原因であった。本研究では,栄養要求性E.piscicida変異体を生産するために,CRISPR/Cas9系を従来のsacBに基づく対立遺伝子交換法の代わりに使用した。最適CRISPR工学条件下で,著者らは,alrまたはasd遺伝子ノックアウトE.piscicida auxtrophic変異体のいずれかを効率的に生産することができ,このゲノム編集過程は,対立遺伝子交換法よりも非常に簡単で,速かった。確立したCRISPR/Cas9系を用いて,二重栄養要求遺伝子(alrおよびasd)の同時ノックアウトおよびE.piscicida染色体における外来遺伝子発現カセットの挿入も成功した。さらに,市販ワクチンとしての許可を得る可能性を高めるために,1つのヌクレオチド欠失alr遺伝子(E.piscicida Δalr-1)のみを持つ栄養要求性E.piscicida変異体を作製した。1×106および1×105CFU/魚で免疫したE.piscicida Δalr-1のヒラメ(Paralichthys olivaceus)フィンガーリングは,血清凝集活性の誘導およびE.piscicidaに対する防御において,殺したE.piscicidaと比較して優れた能力を示した。しかし,1×107CFU/魚類のE.piscicida Ampalr-1で免疫したヒラメは,チャレンジ前に高い死亡率を示し,モリントと死んだ魚からの分離したE.piscicidaは野生型alr遺伝子を持ち,オリーブヒラメの2番目の変異により1つの塩基欠失alr遺伝子の原形への復帰を示唆した。したがって,E.piscicida変異体の安定維持のための編集ヌクレオチドの最小数に関する研究をさらに行うべきである。Copyright 2022 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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免疫反応一般 

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