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J-GLOBAL ID：202202278454362444   整理番号：22A0551670

YTHDF1はYTHDF1-AGO2相互作用と相分離を介してmRNA分解を促進する【JST・京大機械翻訳】

YTHDF1 promotes mRNA degradation via YTHDF1-AGO2 interaction and phase separation

著者 (20件)： Li Jiong (School of Basic Medical Sciences, Wuhan University, Wuhan, China) ,  Li Jiong (Hubei Provincial Key Laboratory of Developmentally Originated Disease, Wuhan, China) ,  Chen Ke (Department of Urology, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, China) ,  Dong Xin (School of Basic Medical Sciences, Wuhan University, Wuhan, China) ,  Xu Yating (School of Basic Medical Sciences, Wuhan University, Wuhan, China) ,  Sun Qi (School of Basic Medical Sciences, Wuhan University, Wuhan, China) ,  Wang Honghong (School of Basic Medical Sciences, Wuhan University, Wuhan, China) ,  Chen Zhen (School of Basic Medical Sciences, Wuhan University, Wuhan, China) ,  Liu Cong (School of Basic Medical Sciences, Wuhan University, Wuhan, China) ,  Liu Rong (School of Basic Medical Sciences, Wuhan University, Wuhan, China) ,  Yang Zhe (College of Life Science, Liaoning University, Liaoning, China) ,  Mei Xiangfei (School of Basic Medical Sciences, Wuhan University, Wuhan, China) ,  Zhang Rongyu (College of Biomedicine and Health, Huazhong Agricultural University, Wuhan, China) ,  Chang Liuping (College of Biomedicine and Health, Huazhong Agricultural University, Wuhan, China) ,  Tian Zongwen (School of Basic Medical Sciences, Wuhan University, Wuhan, China) ,  Chen Jianjun (Department of Systems Biology, City of Hope Comprehensive Cancer Center, Los Angeles, California, USA) ,  Liang Kaiwei (School of Basic Medical Sciences, Wuhan University, Wuhan, China) ,  He Chunjiang (College of Biomedicine and Health, Huazhong Agricultural University, Wuhan, China) ,  Luo Mengcheng (School of Basic Medical Sciences, Wuhan University, Wuhan, China) ,  Luo Mengcheng (Hubei Provincial Key Laboratory of Developmentally Originated Disease, Wuhan, China)
資料名： Cell Proliferation  (Cell Proliferation)
巻： 55  号： 1  ページ： e13157  発行年： 2022年 
JST資料番号： T0301A  ISSN： 0960-7722  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 目的:YTHDF1はm6Aリーダー蛋白質として知られており,YTHDF1の多くの研究はmRNA翻訳効率の調節に焦点を当てた。しかし,YTHDF1はRNA分解にも関連するが,YTHDF1はmRNA分解を調節する。液-液相分離(LLPS)は,哺乳動物細胞における膜のない区画の形成を基盤とし,LLPSとのRNA分解の相関に焦点を当てた報告はほとんどない。本研究では,LLPSを介したYTHDF1分解mRNAの機構に焦点を当てた。材料と方法:CRISPR/Cas9ノックアウトシステムを用いて,YTHDF1ノックアウト(YTHDF1-KO)細胞株(HEK293とHeLa)とMETTL14ノックアウト(METTL14-KO)細胞株(HEK293)を確立した。4SU-TT-seqを用いて,mRNAの半減期変化をチェックした。アクチノマイシンDとqPCRを用いて,個々のmRNAの半減期変化を試験した。RNAは野生型(WT)とYTHDF1-KO HeLa細胞株でSYTO RNA選択色素で染色した。YTHDF1とAGO2の共局在を免疫蛍光により同定した。YTHDF1とAGO2の相互作用ドメインをウェスタンブロットによって同定した。YTHDF1の相分離をin vitroおよびin vivoで行った。光漂白(FRAP)後の蛍光回復を,それらの流動性の評価として液滴上で行った。結果:本研究では,YTHDF1の欠失が細胞質に沈着した大量のRNAパッチをもたらすことを見出した。4SU-TT-seqの結果は,YTHDF1の欠失がmRNAの半減期を延長することを示した。免疫蛍光データはYTHDF1とAGO2がP体に共局在し,Co-IP結果はYTHDF1がYT521-B相同性(YTH)ドメインを介してAGO2と相互作用することを示した。YTHDF1はin vitroおよびin vivoで相分離をおこなうことができ,AGO2と比較して,YTHDF1はP体形成においてより重要であることを確認した。FRAPの結果は,YTHDF1が削除されたとき,液体AGO2液滴がゲル/固体に変換することを示した。AGO2はmiRISCsにおいて重要な役割を果たすので,miRNA仲介mRNA分解がYTHDF1に関連することも見出した。結論:YTHDF1はYTHドメインを介してAGO2を動員する。YTHDF1はLLPSを介してP体形成を促進することにより標的mRNAを分解した。YTHDF1の欠失はP体を液滴からゲル/固体液滴へ変化させ,AGO2/RNAパッチを形成し,mRNAの分解遅延をもたらした。これらの知見から,YTHDF1とAGO2の間の以前に認識されていないクロストークを明らかにし,YTHDF1によるmRNA転写後調節の新しい見解を提起した。Copyright 2022 Wiley Publishing Japan K.K. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

シソーラス用語： 液滴 ,  蛍光 ,  半減期 ,  ゲル ,  *RNA【核酸】 ,  *mRNA ,  細胞質 ,  色素 ,  タンパク質 ,  翻訳【遺伝】 ,  in vitro実験 ,  定量的PCR法
準シソーラス用語： マイクロRNA ,  ドメイン構造 ,  *RNA分解 , 【Automatic Indexing@JST】

著者キーワード (5件)： AGO2 ,  LLPS ,  mRNA分解 ,  RNAパッチ ,  YTHDF1

分類 (1件)： 遺伝子発現  (EC02040Q)

タイトルに関連する用語 (5件)： Ago2 ,  相互作用 ,  相分離 ,  mRNA分解 ,  促進