気管内アデノ随伴ウイルスは齧歯類肺移植における静的冷蔵中の遺伝子導入を仲介する【JST・京大機械翻訳】

Kesseli S.J.; Krischak M.K.; Gao Q.; Halpern S.E.; Zhang M.; Song M.; Gonzalez T.J.; Asokan A.; Barbas A.S.; Hartwig M.G.

文献

J-GLOBAL ID：202202279714905793 整理番号：22A1119289

気管内アデノ随伴ウイルスは齧歯類肺移植における静的冷蔵中の遺伝子導入を仲介する【JST・京大機械翻訳】

Intra-Tracheal Adeno-Associated Virus Mediates Gene Transduction During Static Cold Storage in Rodent Lung Transplantation

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資料名：
巻： 41 号： 4 S ページ： S38-S39 発行年： 2022年
JST資料番号： W3128A ISSN： 1053-2498 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：短報発行国：オランダ (NLD) 言語：英語 (EN)

ラット肺移植片における静的冷蔵(SCS)中にレポーター遺伝子を送達するために気管内アデノ随伴ウイルス(AAV)の有効性を試験した。ホタルルシフェラーゼをコードする組換えAAVサブタイプ-9ベクターをHEK293細胞(AAV-Luc)において産生した。Lewisラット肺移植片は,100μLの生理食塩水([8e8VG/μL],N=3),4e11 VGを100μLの生理食塩水([4e9VG/μL],N=3),または100μLの生理食塩水(N=2)で1時間のSCSの間,気管を介して,それぞれ8e10のウイルスゲノム(VG)を受けた。同種ラットは,単一左肺移植を受けた。動物は,術後1週,2週,4週および8日目に生物発光イメージングを受け,次に屠殺した。外植組織を溶解して,レポーター活性を定量化するためにルシフェリンとインキュベートした。免疫組織化学は,緑色蛍光蛋白質(GFP)をコードするAAVの4e11 VGで処理した肺で移植されたラットから組織を用いて行い,14日目(N=2)で屠殺した。移植後,AAV-Luc(Figure 1A)を受けた動物の左胸にin vivo生物発光が観察された。in vivoシグナルは両群で同様であり(平均放射輝度7.6e4対7.1e4光子/秒/s/s/sr),対照動物(平均6.1e4p/s/cm2/sr Figure 1B)と同程度であった。外植移植肺では,平均ルミネセンス活性は,対照の1グラム組織あたり9.2e2相対発光単位(RLU)であり,[4e9VG/μL]AAV-Luc(Figure1C)を受けた移植片において,[8e8VG/μL]と2.0e5RLU/gの移植片における3.0e4RLU/gと比較した。免疫組織化学は,AAV-GFP処置肺のみ(Figure 1D)の肺細胞において,陽性GFP染色を明らかにした。ここでは,SCS中の気管内AAV仲介遺伝子導入の成功を初めて示し,その後,明らかなオフターゲット発現なしで少なくとも8週間,ドナー肺における発現を示した。遺伝子発現は,この投与経路で肺胞気球で主に見られるようである。Copyright 2022 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】

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遺伝子操作 , ウイルスの生理一般

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