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J-GLOBAL ID:202202287106861339   整理番号:22A0649161

ジヒドロ葉酸レダクターゼの単一分子サンプリングは速度論的休止と触媒作用に連結するエンドステリック効果を示す【JST・京大機械翻訳】

Single-Molecule Sampling of Dihydrofolate Reductase Shows Kinetic Pauses and an Endosteric Effect Linked to Catalysis
著者 (2件):
資料名:
巻: 12  号:ページ: 1228-1236  発行年: 2022年 
JST資料番号: W5035A  ISSN: 2155-5435  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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同じ単一酵素に対する多重反応試料の能力は,希少中間体を触媒と連結し,配座転移の役割を解明するために重要である。しかし,何十年かの努力にもかかわらず,複数の触媒ターンオーバーの間の非蛍光酵素の単一分子特性化は,分かりにくい。ここでは,ナノポア電流がジヒドロ葉酸レダクターゼ(DHFR)触媒中の5つの構造中間体間の動的交換をサンプリングできることを示した。著者らは,endosteric効果が特異的階層構造を持つ酵素への基質の結合を促進することを見出した。次に,化学ステップは酵素を閉鎖型から閉鎖型立体配座に切り替え,次に還元補因子NADP+の放出を促進した。意外なことに,わずかな反応性錯体のみが触媒作用をもたらす。さらに,第2の長い触媒休止が観察され,おそらく反応中に生成したオフパス立体配座を反映している。最後に,多重補因子結合事象からの自由エネルギーは,生成物を放出し,DHFRを反応性配座異性体に切り替えるために必要であった。この触媒燃料協奏機構は,高濃度のNADP+下でDHFRの触媒効率を改善するために進化し,生成物の結合と放出を厳密に制御しなければならない複雑な酵素反応の一般的な特徴である可能性がある。Copyright 2022 American Chemical Society All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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酵素一般 

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