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J-GLOBAL ID:202202289111119406   整理番号:22A1177568

北極由来菌類Eutypella種のプロトプラスト調製の最適化と形質転換系の確立【JST・京大機械翻訳】

Optimization of Protoplast Preparation and Establishment of Genetic Transformation System of an Arctic-Derived Fungus Eutypella sp.
著者 (6件):
資料名:
巻: 13  ページ: 769008  発行年: 2022年 
JST資料番号: U7080A  ISSN: 1664-302X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: スイス (CHE)  言語: 英語 (EN)
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北極由来真菌Eutypella sp.D-1は,二次代謝産物を合成するその巨大な能力のため,広い注目を集めている。しかし,現在の研究は,OSMAC戦略による新しい二次代謝産物の産生を刺激することに焦点を当て,二次代謝産物と生合成遺伝子クラスター(BGC)の間の関係は検討されていない。本研究では,Eutypella sp.D-1プロトプラストの調製と再生条件を調べ,この菌類の形質転換の研究のための基礎を構築した。直交実験は,最適調製条件が,0.75MのNaCl,20g/Lの溶解酵素,および20g/Lのドリセラーゼ,28°C,6時間であることを示した。Eutypella sp.D-1プロトプラストの最大収率は6.15×106細胞/mlに達し,浸透圧安定剤NaClの濃度はEutypella sp.D-1プロトプラストの最も重要な因子であった。FDA染色の結果は,調製したプロトプラストには良い活性があることを示した。さらに,最良のプロトプラスト再生培地はYEPSであり,その最大再生率は36%であった。SRおよびRMのような窒素源を有する培地は,Eutypella sp.D-1プロトプラスト再生に良好な影響を及ぼし,窒素源がEutypella sp.D-1プロトプラスト再生に重要な役割を果たすことを示した。その後の形質転換実験は,ヒグロマイシン耐性遺伝子(hrg)がEutypella sp.D-1のゲノムに首尾よく転写され,調製したプロトプラストがその後の遺伝子操作と研究のニーズを満たすことを示した。本研究は,Eutypella sp.D-1の遺伝的形質転換の基礎を築く。Copyright 2022 The Author(s) All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (2件):
分類
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微生物代謝産物の生産  ,  代謝と栄養 
引用文献 (28件):
  • Flor-Parra I., Zhurinsky J., Bernal M., Gallardo P., Daga R. R. (2014). A Lallzyme MMX-based rapid method for fission yeast protoplast preparation. Yeast 31, 61-66. doi: , PMID: doi: 10.1002/yea.2994
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