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J-GLOBAL ID:202202297399952105   整理番号:22A0472301

ヒト血清中の5-メチルシトシンと5-ヒドロキシメチルシトシンの同時定量のためのデジタル免疫PCRアッセイ【JST・京大機械翻訳】

A digital immuno-PCR assay for simultaneous determination of 5-methylcytosine and 5-hydroxymethylcytosine in human serum
著者 (7件):
資料名:
巻: 1192  ページ: Null  発行年: 2022年 
JST資料番号: A0394A  ISSN: 0003-2670  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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本研究は二重DNAメチル化マークの同時検出のための超高感度及び特異的イムノソルベントアッセイの開発を目的とした。疾患診断,臨床治療および予後,5-メチルシトシン(5mC)および5-ヒドロキシメチルシトシン(5hmC)における最も重要な指標を,概念実証標的として選択した。記載された戦略は,ストレプトアビジン-磁気ナノ粒子でのPhos-タグビオチン固定,抗-5mC抗体の特異的免疫認識および抗-5hmC抗体およびBarコード-抗体の標識,免疫PCRおよびデジタルPCRマシンのシグナル増幅から成った。最適条件下で,デジタル免疫PCRアッセイは,2.7×10-13mol/Lから2.7×10-9mol/Lまでのボードダイナミックレンジを示し,検出限界は5mCで61.7fmol/L,5hmCで0.111pmol/Lであった。LODの16倍および186倍の改善を,リアルタイム免疫PCRと比較して,5mCおよび5hmC検出に対して提案した方法によって得た。このアプローチは理想的な特異性,再現性及び安定性を示した。回復試験は,ディジタル免疫PCRアッセイがヒト血清試料中の2つのDNAメチル化マークの同時決定のための有望なプラットフォームであることを示した。Copyright 2022 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.【JST・京大機械翻訳】
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分類 (1件):
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バイオアッセイ 
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