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J-GLOBAL ID：200903002747600102

DNA分子索引法

Inventor： 加藤 菊也
Applicant, Patent owner： 新技術事業団
Agent (1)： 平木 祐輔
Gazette classification：公開公報
Application number (International application number)：1995234122
Publication number (International publication number)：1996322598
Application date： Sep. 12, 1995
Publication date： Dec. 10, 1996
Summary：

【要約】 (修正有)【構成】 以下の工程:組織または細胞由来のRNAから逆転写したcDNAをClass IIS 制限酵素にて切断し、切断断片の付着末端に対応する配列を含むビオチニル化アダプターを上記cDNAにライゲートし、上記とは異なる制限酵素にてさらに上記cDNAを切断し、この異なる制限酵素をそれぞれ最初の切断に用いて、上述の操作を繰り返し、ストレプトアビジン被覆常磁気ビーズでライゲートサンプルを回収後、ライゲートサンプルよりビオチニル化アダプターに相補なオリゴヌクレオチドを除去し、上記cDNAをPCR法にて増幅し、増幅産物を変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動によって分離し、断片のサイズを記録することを含むDNA分子索引法。【効果】 検体の細胞や組織に発現している遺伝子の分析パターンを正常な遺伝子の分析パターンと比較することにより、腫瘍などの変異を容易に正確かつ迅速に診断することができる。

Claim (excerpt)：

以下の工程:(1) 組織または細胞由来のRNAから逆転写したcDNAをClass IIS 制限酵素にて切断し、(2) 切断断片の付着末端に対応する配列を含むビオチニル化アダプターを上記cDNAにライゲートし、(3) (1) で使用したものとは異なる他の2種のClass IIS 制限酵素にてさらに上記cDNAを切断し、(4) (3) の他の2種のClass IIS 制限酵素をそれぞれ最初の切断に用いて、(1) 〜(3) を繰り返し、(5) ストレプトアビジン被覆常磁気ビーズでライゲートサンプルを回収後、ライゲートサンプルよりビオチニル化アダプターに相補なオリゴヌクレオチドを除去し、(6) アダプター-プライマーとアンカーオリゴ(dT)プライマーとを用いて上記cDNAをPCR法にて増幅し、(7) 増幅産物を変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動によって分離し、断片のサイズを記録することを含むDNA分子索引法。

IPC (4)：

C12Q 1/68 ,  C07H 21/02 ,  C07H 21/04 ,  C12N 15/09 ZNA

FI (4)：

C12Q 1/68 A ,  C07H 21/02 ,  C07H 21/04 B ,  C12N 15/00 ZNA A