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J-GLOBAL ID：200903007621210769

タンパク質の発現方法

Inventor： 上田 太郎 ,  野口 太郎
Applicant, Patent owner： 独立行政法人産業技術総合研究所
Gazette classification：公開公報
Application number (International application number)：2006268914
Publication number (International publication number)：2008086225
Application date： Sep. 29, 2006
Publication date： Apr. 17, 2008
Summary：

【課題】宿主細胞において過剰発現が抑制されているタンパク質を、遺伝子工学的手法を用いて効率的に大量生産する手法を提供する。【課題解決手段】宿主細胞において過剰発現が抑制されているタンパク質、タンパク分解酵素の切断部位および上記タンパク質と結合することにより、該タンパク質に対する発現量制御系の関与を外すタンパク質、あるいはさらに精製用のタグからなる融合タンパク質をコ-ドする遺伝子を用いて、宿主細胞において上記融合タンパク質を発現させ、得られた融合タンパク質をタンパク分解酵素で切断することにより、上記過剰発現が抑制されているタンパク質を製造する。【選択図】なし

Claim (excerpt)：

以下の(a)〜(f)の工程を含むことを特徴とする、宿主細胞において過剰発現が抑制されているタンパク質の製造方法。 (a)宿主細胞において過剰発現が抑制されているタンパク質をコ-ドする遺伝子DNAと、該タンパク質と結合することにより、該タンパク質に対する発現量制御系の関与を外すタンパク質またはペプチドをコ-ドする遺伝子を、タンパク分解酵素の切断部位をコ-ドするヌクレオチド配列を含むリンカ-ポリヌクレオチドを介して結合せしめて融合遺伝子を調製する工程。 (b)上記融合遺伝子をベクタ-に挿入し、組み換えベクタ-を得る工程。 (c)上記組み換えベクタ-を宿主細胞に導入して形質転換体を得る工程 (d)上記形質転換体を培養し、培養物から融合タンパク質を得る工程。 (e)得られた融合タンパク質をタンパク分解酵素で切断し、宿主細胞において過剰発現が抑制されているタンパク質を得る工程。 (f)切断されたタンパク質の混合液から、上記発現を調節するタンパク質を除去し、宿主細胞において過剰発現が抑制されているタンパク質を精製する過程。

IPC (8)：

C12N 15/09 ,  C12N 1/15 ,  C12N 1/19 ,  C12N 1/21 ,  C12N 5/10 ,  C12P 21/02 ,  C07K 19/00 ,  C07K 14/37

FI (8)：

C12N15/00 A ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12N5/00 A ,  C12P21/02 C ,  C07K19/00 ,  C07K14/37

F-Term (35)：

4B024AA20 ,  4B024BA80 ,  4B024CA02 ,  4B024CA07 ,  4B024CA09 ,  4B024CA11 ,  4B024CA20 ,  4B024DA20 ,  4B024EA04 ,  4B024GA14 ,  4B024HA01 ,  4B064AG01 ,  4B064CA05 ,  4B064CA19 ,  4B064CC24 ,  4B064DA01 ,  4B064DA10 ,  4B064DA16 ,  4B065AA86X ,  4B065AA86Y ,  4B065AB01 ,  4B065AC14 ,  4B065BA03 ,  4B065CA24 ,  4B065CA41 ,  4B065CA44 ,  4H045AA10 ,  4H045AA20 ,  4H045AA30 ,  4H045BA10 ,  4H045BA41 ,  4H045CA10 ,  4H045EA01 ,  4H045EA20 ,  4H045FA74

Patent cited by the Patent：

Cited by applicant (4)

• タンパク質の生産方法、融合タンパク質及びタンパク質
  Gazette classification：公開公報   Application number：特願2002-184787   Applicant：積水化学工業株式会社
• 重金属吸収能を有する形質転換生物体及びそれを用いた重金属類浄化方法
  Gazette classification：公開公報   Application number：特願2000-098432   Applicant：太平洋セメント株式会社
• がんの診断法および予後予測法
  Gazette classification：公表公報   Application number：特願平10-503161   Applicant：チルドレンズ・メデイカル・センター・コーポレイシヨン
• 毒性を有するタンパク質の発現方法
  Gazette classification：公開公報   Application number：特願2006-223042   Applicant：独立行政法人産業技術総合研究所

Cited by examiner (3)

• タンパク質の生産方法、融合タンパク質及びタンパク質
  Gazette classification：公開公報   Application number：特願2002-184787   Applicant：積水化学工業株式会社
• 重金属吸収能を有する形質転換生物体及びそれを用いた重金属類浄化方法
  Gazette classification：公開公報   Application number：特願2000-098432   Applicant：太平洋セメント株式会社
• がんの診断法および予後予測法
  Gazette classification：公表公報   Application number：特願平10-503161   Applicant：チルドレンズ・メデイカル・センター・コーポレイシヨン

Article cited by the Patent：

Cited by applicant (6)

• Biochemistry, 2004, vol.43, pp.11554-11559
• Molecular Microbiology, 2004, vol.53 no.2, pp.469-483
• Molecular Biology of the Cell, 1994, vol.5 suppl, p.381A 2213
• FEBS LETTERS, 1993, vol.316 no.1, pp.41-47
• Journal of Cell Science, 2001, vol.114 no.7, pp.1367-1377
• THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, 2007, vol.282 no.38, pp.27721-27727

Cited by examiner (5)

• Molecular Microbiology, 2004, vol.53 no.2, pp.469-483
• Molecular Biology of the Cell, 1994, vol.5 suppl, p.381A 2213
• FEBS LETTERS, 1993, vol.316 no.1, pp.41-47
• Journal of Cell Science, 2001, vol.114 no.7, pp.1367-1377
• Biochemistry, 2004, vol.43, pp.11554-11559