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J-GLOBAL ID：200903023445686374

マウス細胞のための相同的組換え抗体発現系

Inventor： ホリス, グレゴリー フランクリン ,  マーク, ジョージ イー.
Applicant, Patent owner： メルク アンド カンパニー, インコーポレイテッド
Agent (1)： 山本 秀策
Gazette classification：公表公報
Application number (International application number)：1995517301
Publication number (International publication number)：1997510865
Application date： Dec. 22, 1994
Publication date： Nov. 04, 1997
Summary：

【要約】相同的組換えにより、特定の染色体の座位への組換え遺伝子の安定な組込みに続いて、高レベルの組換え遺伝子発現を引き起こすマウス宿主細胞のゲノム中の特定の座位が同定される。組換え遺伝子の挿入および発現のための好適なゲノム座位の選択が開示され、DNAベクターおよび宿主細胞も開示される。

Claim (excerpt)：

1)哺乳動物細胞における組換え遺伝子の発現のための相同的組換え発現ベクターであって、該ベクターが、組換え遺伝子の発現のためのプロモーター、選択マーカーをコードする転写ユニット、および相同的組換えターゲッティングのためのマウスの免疫グロブリンγ2A座位特異的DNA配列を含有する、ベクター。2)マウス細胞における組換え遺伝子の発現のための請求項1に記載の相同的組換え発現ベクター。3)NS/O細胞における組換え遺伝子の発現のための請求項2に記載の相同的組換え発現ベクター。4)前記選択マーカーが、gpt、dhfr、抗生物質耐性、またはグルタミン合成酵素転写ユニットからなる群から選択される、請求項1〜3のいずれかに記載の相同的組換え発現ベクター。5)前記選択マーカーが、グルタミン合成酵素転写ユニットである、請求項4に記載の相同的組換え発現ベクター。6)前記プロモーターが、CMV-IEプロモーターである、請求項1〜5のいずれかに記載の相同的組換え発現ベクター。7)前記組換え遺伝子が免疫グロブリン遺伝子である、請求項1〜6のいずれかに記載の相同的組換え発現ベクター。8)哺乳動物細胞における組換え免疫グロブリン遺伝子の発現のための相同的組換え発現ベクターであって、該ベクターが、第1の免疫グロブリン遺伝子の発現のための第1のプロモーター、第2の免疫グロブリン遺伝子の発現のための第2のプロモーター、選択マーカーをコードする転写ユニット、および相同的組換えターゲッティングのためのマウス免疫グロブリンγ2A座位特異的DNA配列を含有する、ベクター。9)前記第1のプロモーターおよび第2のプロモーターがそれぞれCMV-IEプロモーターである、請求項8に記載の相同的組換え発現ベクター。10)前記選択マーカーがグルタミン合成酵素転写ユニットである、請求項8または9に記載の相同的組換え発現ベクター。11)マウス細胞における組換え免疫グロブリン遺伝子の発現のための請求項8〜10に記載の相同的組換え発現べクター。12)マウス細胞における組換え免疫グロブリン遺伝子の発現のための請求項8〜10に記載の相同的組換え発現ベクター。13)NS/O細胞における組換え免疫グロブリン遺伝子の発現のための請求項11に記載の相同的組換え発現ベクター。14)ベクターpIgG2A。15)哺乳動物宿主細胞における組換え遺伝子の発現方法であって、以下の工程:(a)免疫グロブリンγ2A座位特異的相同的組換えベクターを前記宿主細胞に転移する工程であって、該ベクターが組換え遺伝子をコードするDNAを含有し、そして該ベクターが宿主細胞染色体γ2A座位と相同的に組換わる、工程;および(b)選択および組換え遺伝子発現に適切な条件下で該宿主細胞を培養する工程、を包含する、方法。16)前記宿主細胞選択が、gpt、dhfr、抗生物質耐性、またはグルタミン欠乏からなる群から選択される、請求項15に記載の方法。17)前記ベクターが、前記宿主細胞染色体γ2A座位と、前記宿主細胞γ2A座位中の任意の部位で相同的に組換わる、請求項16に記載の方法。

IPC (2)：

C12N 15/09 ZNA ,  C12P 21/02

FI (2)：

C12N 15/00 ZNA A ,  C12P 21/02 C