純度の高いポリA+RNAの精製方法

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Applicant, Patent owner：
Gazette classification：公開公報
Application number (International application number)：2000116845
Publication number (International publication number)：2001299344
Application date： Apr. 18, 2000
Publication date： Oct. 30, 2001
Summary：

【要約】 (修正有)【課題】細胞等の核酸を含有する試料から、高純度のポリA+RNAを簡便でかつ安全に精製する方法並びにそのために用いる試薬の提供。【解決手段】以下の工程(a)〜(k)を含んでなるポリA+RNAの精製方法。(a)核酸を含有する試料をタンパク質変性剤を含む溶液により溶解する工程、(b)必要に応じて緩衝液を添加して、ポリA+RNAを担体に結合させる工程、(c)担体-ポリA+RNA複合体を液相より分離する工程、(d)該複合体を洗浄する工程、(e)ポリA+RNAを該複合体から解離させる工程、(f)該ポリA+RNA溶液に混入するDNAをDNaseで処理する工程、(g)該DNase処理液をタンパク質変性剤を含む溶液と混合する工程、(h)ポリA+RNAを担体に結合させる工程、(i)担体-ポリA+RNA複合体を液相より分離する工程、(j)該複合体を洗浄する工程、(k)ポリA+RNAを該複合体から解離させる工程

Claim (excerpt)：

以下の工程(a)〜(k)を含んでなることを特徴とするポリA+RNAの精製方法。(a)核酸を含有する試料をタンパク質変性剤を含む溶液により溶解する工程、(b)ポリA+RNAをオリゴdTが共有結合もしくは非共有結合により固定化された担体に特異的に吸着させるか、又はポリA+RNAを担体に特異的に結合可能な官能基を有するオリゴdTに結合させ、さらに該官能基に特異的に結合可能な部分を有する担体に結合させる工程、(c)担体-ポリA+RNA複合体を液相より分離する工程、(d)該複合体を洗浄する工程、(e)ポリA+RNAを該複合体から解離させる工程、(f)該ポリA+RNA溶液に混入するDNAをDNaseで処理する工程、(g)該DNase処理液をタンパク質変性剤を含む溶液と混合する工程、(h)ポリA+RNAをオリゴdTが共有結合もしくは非共有結合により固定化された担体に特異的に吸着させるか、又はポリA+RNAを担体に特異的に結合可能な官能基を有するオリゴdTに結合させ、さらに該官能基に特異的に結合可能な部分を有する担体に結合させる工程、(i)担体-ポリA+RNA複合体を液相より分離する工程、(j)該複合体を洗浄する工程、(k)ポリA+RNAを該複合体から解離させる工程

F-Term (4)：

4B024AA20 , 4B024CA11 , 4B024HA11 , 4B024HA19

Patent cited by the Patent：

Cited by examiner (1)

リボ核酸の単離方法
Gazette classification：公開公報 Application number：特願平9-185032 Applicant：東洋紡績株式会社

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