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J-GLOBAL ID：200903035613893621

乳酸菌の高感度検出法

Inventor： 土屋 陽一 ,  狩野 幸信
Applicant, Patent owner： サッポロビール株式会社
Agent (1)： 久保田 藤郎
Gazette classification：公開公報
Application number (International application number)：1992317920
Publication number (International publication number)：1994141899
Application date： Nov. 04, 1992
Publication date： May. 24, 1994
Summary：

【要約】 (修正有)【構成】 乳酸菌を含む検体より、乳酸菌のDNAを抽出し、この抽出物をtRNAを共沈物として用い、エタノール沈澱処理することにより乳酸菌のDNAを回収する。このDNAに対して下記の配列群の少なくとも1つを有するか又は該配列に対応する相補的配列を有するオリゴヌクレオチドをプライマーとしてPCR(Polymerase Chain Reaction)を行い、乳酸菌に特異的な配列を増幅させたのち、乳酸菌の検出を行う。5′-TGTGGTGGCGATAGCCTGAA-3′5′-GCGTGGCAACGTCCTATCCT-3′【効果】 ビールなどの食品中に含まれる乳酸菌を非常に高感度、かつ短時間に検出することができる。

Claim (excerpt)：

下記の工程よりなる乳酸菌の高感度検出法。(1)乳酸菌を含む検体をポリカーボネート製メンブランフィルターを用いて濾過する工程、(2)該フィルターを、揮発性溶液中で超音波処理を行って乳酸菌をフィルターより遊離させた後、揮発性溶液を蒸発させる工程、(3)上記工程で得た検体試料をlysozyme, mutanolysin,proteinase KおよびSDSで処理することによって乳酸菌のDNAを抽出する工程、(4)上記工程で得た抽出物をtRNAを共沈物として用い、エタノール沈殿処理することにより乳酸菌のDNAを回収する工程、(5)乳酸菌DNAに対して、以下の配列群の少なくとも1つを有するか、または該配列に対応する相補的配列を有するオリゴヌクレオチドをプライマーとしてPolymerase Chain Reaction (PCR)を行い、乳酸菌に特異的な配列を増幅させたのち、乳酸菌の検出を行う工程、5’-TGTGGTGGCGATAGCCTGAA-3’......(a)5’-GCGTGGCAACGTCCTATCCT-3’......(b)

IPC (5)：

C12Q 1/68 ZNA ,  C12N 15/00 ,  C12N 15/10 ,  C12Q 1/04 ,  C12R 1:225