生物サンプル中のルシフェラーゼを検出するための方法及び組成物

Inventor：
Applicant, Patent owner：
Agent (1)：社本一夫 (外5名)
Gazette classification：公表公報
Application number (International application number)：2000529456
Publication number (International publication number)：2002501758
Application date： Jan. 18, 1999
Publication date： Jan. 22, 2002
Summary：

【要約】レニラルシフェラーゼのみ、又は、レニラルシフェラーゼ及びホタルルシフェラーゼの両方の存在を、試薬混合物を生物サンプルに添加し、少なくとも1時間の持続を有するグロー発光を生ずることにより検出する。レニラルシフェラーゼのみから発光を生ずるにあたって、セレンテラジン、及び、ジチオスレイトール(DTT)及びEDTA又はDTT及びEDTAの機能的同等物を含んでなる試薬を添加する。ホタルルシフェラーゼ及びレニラルシフェラーゼの両方を含有するサンプルからの発光は、まず、ホタルルシフェリン、ATP、ホタルルシフェラーゼ活性に必要な補助因子(例えば、Ca+2及びMg+2)、ジチオスレイトール(DTT)又はその機能的同等物、及びAMPを含んでなる試薬を添加することによって生ずる。ホタルルシフェラーゼの測定に続いて、セレンテラジン、及び、EDTA又はEDTAの機能的同等物を添加し、レニラルシフェラーゼにより生ずる発光を測定する。

Claim (excerpt)：

サンプルの発光を測定することにより該サンプル中のレニラルシフェラーゼの存在を検出する方法であって、 a.レニラルシフェラーゼを含有すると推測されるサンプルを、セレンテラジン、及びフリーラジカルスカベンジャーとしてジチオスレイトール(DTT)、及びキレート剤としてエチレンジアミン四酢酸(EDTA)、又は、DTT及びEDTAの機能的同等物を含有する試薬混合物と混ぜること;及び b.(a)の混合物により生ずる発光を測定すること、を含んでなる方法。

IPC (3)：

C12Q 1/66 , G01N 21/76 , C12N 9/99

FI (3)：

C12Q 1/66 , G01N 21/76 , C12N 9/99

F-Term (17)：

2G054CA28 , 2G054EA03 , 2G054GA04 , 4B063QA01 , 4B063QA18 , 4B063QQ08 , 4B063QQ22 , 4B063QR41 , 4B063QR42 , 4B063QR47 , 4B063QR48 , 4B063QR50 , 4B063QR51 , 4B063QR54 , 4B063QR67 , 4B063QS38 , 4B063QX02

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