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J-GLOBAL ID：200903051485749380

低温アルカリプロテアーゼ、これを生産する微生物及び当該アルカリプロテアーゼの製造法

Inventor： 渡邊 啓一 ,  佐伯 勝久 ,  森 啓 ,  小林 徹 ,  伊藤 進
Applicant, Patent owner： 花王株式会社
Agent (1)： 有賀 三幸 (外3名)
Gazette classification：公開公報
Application number (International application number)：1995135056
Publication number (International publication number)：1996322562
Application date： Jun. 01, 1995
Publication date： Dec. 10, 1996
Summary：

【要約】【構成】 次の酵素学的性質を有する低温アルカリプロテアーゼ、これを生産する微生物及び当該アルカリプロテアーゼの製造法。1)作用温度及び最適温度0〜70°Cで作用し、最適温度は約40°Cである。Ca2+イオンが存在すると作用最適温度は50°Cに移行する。10°Cにおいても最適温度活性値の約20%、0°Cにおいても最適温度活性値の約10%の活性を保持する。2)温度安定性pH8.0、15分間の処理条件で45°Cまで安定であり、Ca2+イオンが存在すると50°Cまで安定である。3)作用pH及び最適pHpH4〜12以上で作用し、最適pHは11である。pH12においても、最大活性値の70%以上の活性を保持する。4)pH安定性20°C、15分間の処理条件でpH5〜12までの各pHで極めて安定である。【効果】 種々の界面活性剤によって活性促進を受け、低温領域においても活性を保持する。

Claim (excerpt)：

次の酵素学的性質を有する低温アルカリプロテアーゼ。1)作用温度及び最適温度0〜70°Cで作用し、最適温度は約40°Cにある。Ca2+イオンが存在すると作用最適温度は50°Cに移行する。10°Cにおいても最適温度活性値の約20%、0°Cにおいても最適温度活性値の約10%の活性を保持する。2)温度安定性pH8.0、15分間の処理条件で45°Cまで安定であり、Ca2+イオンが存在すると50°Cまで安定である。3)作用pH及び最適pH作用pH範囲は4〜12以上で、最適pHは11である。pH12においても、最大活性値の70%以上の活性を保持する。4)pH安定性20°C、15分間の処理条件でpH5〜12までの各pHで極めて安定である。5)分子量ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)-ポリアクリルアミドゲル電気泳動法による推定分子量は、約54,000である。6)基質特異性天然基質であるカゼイン、尿素変性ヘモグロビン及び卵黄に対して作用する。合成基質であるSuc-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA、Suc-Ala-Ala-Pro-Leu-pNA、Suc-Ala-Ala-Val-Ala-pNA及びZ-Ala-Ala-Leu-pNA(ここでSucはサクシニル基を、pNAはp-ニトロアニリニル基を、Zはカルボベンゾイル基を示す)に対して作用し、p-ニトロアニリンを遊離させる。7)金属イオンの影響Hg2+及びZn2+イオンによって阻害される。8)阻害剤EDTA、フェニルメタンスルホニルフルオライド(PMSF)、キモスタチン及びp-クロロマーキュリ安息香酸(PCMB)によって阻害される。ジチオスレイトール(DTT)、N-エチルマレイミド(NEM)、5,5′-ジチオ-ビス(2-ニトロ安息香酸)(DTNB)、ベスタチン、ロイペプチン、ペプスタチン及びホスホラミドンによって阻害を受けない。9)界面活性剤の影響アルカン硫酸ナトリウム(SAS)、α-オレフィン硫酸ナトリウム(AOS)、ポリオキシエチレンアルキル硫酸ナトリウム(ES)、ソフタノール70H及びα-スルホ脂肪酸エステル(α-SFE)によって2〜7倍の活性促進を受ける。ドデシル硫酸ナトリウム(SDS)に対しても安定である。

IPC (4)：

C12N 9/52 ,  C12N 1/20 ,  C11D 3/386 ,  C12R 1:01

FI (3)：

C12N 9/52 ,  C12N 1/20 A ,  C11D 3/386