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J-GLOBAL ID：200903061856958641

親和結合毛細管電気泳動による微量分析物の定量

Inventor： カルガー,バリー,エル. ,  シムラ,キヨヒト
Applicant, Patent owner： ノースイースタン ユニバーシティ
Agent (1)： 秋元 輝雄
Gazette classification：公表公報
Application number (International application number)：1994517085
Publication number (International publication number)：1996506182
Application date： Jan. 12, 1994
Publication date： Jul. 02, 1996
Summary：

【要約】サンプル中の微量の分析物の定量的検出方法が開示される。好ましい実施例における方法は、反応性スルフヒドリル基において蛍光染料で標識された免疫グロブリンFab’フラグメントを提供し;分析物を含む可能性があるサンプルと該標識Fab’フラグメントとを合わせ;得られた混合物の成分を電場で濃縮し;毛細管電気泳動によって、形成された標識分析物/作用物質複合体を一切の未反応標識作用物質から分離し;さらに標識分析物/作用物質複合体の蛍光信号を検出することを含む。本発明はまた、標識Fab’フラグメントの製造方法にも関するが、本方法は、免疫グロブリン分子を切断して1つのF(ab’)2フラグメントを得て;該F(ab’)2フラグメントのジスルフィド結合を還元し、各々が少なくとも1つの自由な反応性スルフヒドリル基をもつ2つのFab’フラグメントを得て;さらに、少なくとも1つの自由なスルフヒドリル基をもつFab’フラグメントを、自由なスルフヒドリル基と反応する蛍光染料と混合し、標識Fab’フラグメントを生成することを含む。好ましくは、最終混合工程の前に、鎖内ジスルフィド結合が各Fab’フラグメント内で酸化によって形成され、これによって、個々のFab’フラグメントがそれぞれ唯1つの反応性スルフヒドリル基をもつFab’フラグメントが製造される。この定量的検出方法はまた、より広範囲に標的分析物と複合体を形成するいずれの生物学的特異的作用物質の使用も含む。

Claim (excerpt)：

反応性スルフヒドリルにおいて検出可能なレポーター基で標識された免疫グロブリンFab’フラグメントであって、当該分析物に結合し分析物-Fab’フラグメント複合体を形成できる当該Fab’フラグメントを提供し; 当該標識Fab’フラグメントを当該分析物を含む可能性があるサンプルと混合物中で組み合わせ; 毛細管電気泳動によって当該混合物の成分を分離し;さらに; 当該サンプル中の当該分析物の存在の表示として、当該分析物-Fab’複合体上の当該レポーター基を検出するという工程を含むサンプル中の微量分析物の定量的検出方法。

IPC (3)：

G01N 33/538 ,  G01N 27/447 ,  G01N 33/532

Patent cited by the Patent：

Cited by examiner (2)

• 特開昭64-032170
  
• 特開昭63-045561