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J-GLOBAL ID：200903063109737680

ヘリカーゼ活性の測定方法

Inventor： 秋光 信佳 ,  野田 尚宏 ,  谷 英典 ,  常田 聡
Applicant, Patent owner： 独立行政法人産業技術総合研究所
Gazette classification：公開公報
Application number (International application number)：2006285671
Publication number (International publication number)：2008099619
Application date： Oct. 20, 2006
Publication date： May. 01, 2008
Summary：

【課題】ヘリカーゼの二本鎖核酸を一本鎖核酸へ解離させる活性を、放射性同位体元素や電気化学的測定手法、FRETなどを用いずに、簡便かつ安価に測定可能にする方法を提供する。【解決手段】へリカーゼ活性を測定するための基質として、核酸構成塩基の近接、離間により、蛍光強度が変化する蛍光色素で標識した核酸と、該核酸と相補の塩基配列を有する他方の核酸とにより、蛍光標識二本鎖核酸を調製し、この蛍光標識2本鎖核酸を基質として、ヘリカーゼによる酵素反応を行い、一本鎖核酸への解離に伴い、変化する蛍光強度を測定する。【選択図】なし

Claim (excerpt)：

少なくとも以下の(a)〜(c)の工程を含むことを特徴とするヘリカーゼ活性の測定方法。 (a)核酸の構成塩基との近接、離間によって蛍光強度が変化する蛍光色素を有する一本鎖核酸と、該一本鎖核酸と相補的な塩基配列を有する他方の一本鎖核酸とからなる二本鎖核酸を用意する工程。 (b)該二本鎖核酸を基質として、ヘリカーゼによる酵素反応を行う工程。 (c)前記酵素反応の反応産物からの蛍光強度を測定する工程。

IPC (2)：

C12Q 1/25 ,  C12Q 1/68

FI (2)：

C12Q1/25 ,  C12Q1/68 A

F-Term (14)：

4B063QA01 ,  4B063QA18 ,  4B063QQ21 ,  4B063QQ42 ,  4B063QQ52 ,  4B063QQ95 ,  4B063QR32 ,  4B063QR35 ,  4B063QR42 ,  4B063QR54 ,  4B063QR66 ,  4B063QS34 ,  4B063QS36 ,  4B063QX02

Patent cited by the Patent：

Cited by applicant (2)

• 電気化学ルミネセンスヘリカーゼアッセイ
  Gazette classification：公表公報   Application number：特願2001-528637   Applicant：アベンティス・ファーマスーティカルズ・インコーポレイテツド
• ヘリカーゼの基質特異性の同定方法
  Gazette classification：公開公報   Application number：特願2004-069383   Applicant：東陶機器株式会社

Cited by examiner (2)

• 核酸の測定方法に用いる核酸プローブおよびデータを解析する方法
  Gazette classification：公開公報   Application number：特願2003-081379   Applicant：独立行政法人産業技術総合研究所, 環境エンジニアリング株式会社
• 核酸定量用試薬及びそれを用いる核酸の定量方法
  Gazette classification：公開公報   Application number：特願2004-188390   Applicant：独立行政法人産業技術総合研究所

Article cited by the Patent：

Cited by examiner (3)

• PNAS, 1994, Vol.91, p.6644-6648
• Anal. Sci., 2001, Vol.17, p.155-160
• Nuc. Acid. Res., 2001, Vol.29, No.6 e34, p.1-5