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J-GLOBAL ID：200903072335779661

組換え酵素を用いた遺伝子増幅方法

Inventor：
上平 正道

About 上平 正道

, 
河邉 佳典

About 河邉 佳典

, 
竹之内 雄太

About 竹之内 雄太


Applicant, Patent owner：
国立大学法人九州大学

About 国立大学法人九州大学


Agent (6)： 社本 一夫 ,  小野 新次郎 ,  小林 泰 ,  千葉 昭男 ,  富田 博行 ,  野▲崎▼ 久子
Gazette classification：公開公報
Application number (International application number)：2008034640
Publication number (International publication number)：2009189318
Application date： Feb. 15, 2008
Publication date： Aug. 27, 2009
Summary：
【課題】組換え酵素Creと、スペーサー領域、並びにその左右にそれぞれ配置された左アーム領域及び右アーム領域からなる、Creのターゲットサイトとを用いる遺伝子組換え方法における、アーム変異と、2以上の各々独立して機能するスペーサー変異との組み合わせ使用方法を提供する。【解決手段】野生型左アーム領域、スペーサー領域1、及び変異型右アーム領域からなるターゲットサイト1;変異型左アーム領域、スペーサー領域1、及び野生型右アーム領域からなるターゲットサイト2;野生型左アーム領域、スペーサー領域1とは独立して機能可能なスペーサー領域2、及び変異型右アーム領域からなるターゲットサイト3;及び変異型左アーム領域、スペーサー領域2、及び野生型右アーム領域からなるターゲットサイト4を用いる遺伝子組換え方法。【選択図】図2A
Claim (excerpt)：
組換え酵素Creと、 スペーサー領域、並びにその左右にそれぞれ配置された左アーム領域及び右アーム領域からなる、Creのターゲットサイトと を用いる遺伝子組換え方法であって: (A) スペーサー領域1、変異のある一方のアーム領域、及び野生型である他方のアーム領域からなるターゲットサイト1であって、宿主染色体に導入されたもの; (B) 遺伝子1、及び遺伝子1の両側にそれぞれ連結されたターゲットサイト2及びターゲットサイト3を含む組込カセットであって、 このときターゲットサイト2は、スペーサー領域1、及び変異のある、ターゲットサイト1とは反対側であって、かつ遺伝子1に近い側である一方のアーム領域、及び野生型である他方のアーム領域からなり、そして ターゲットサイト3は、スペーサー領域1とは独立して機能可能なスペーサー領域2、及び変異のある、ターゲットサイト1と同じ側であって、かつ遺伝子1に近い側である一方のアーム領域、及び野生型である他方のアーム領域からなるもの;及び (C) 遺伝子2、遺伝子2の両側にそれぞれ連結されたターゲットサイト4及びターゲットサイト5を含む置換カセットであって、 このときターゲットサイト4は、スペーサー領域2、及び変異のある、ターゲットサイト1とは反対側であって、かつ遺伝子2に近い側の一方のアーム領域、及び野生型である他方のアーム領域からなるもの このときターゲットサイト5は、スペーサー領域3(但し、スペーサー領域3は、スペーサー領域1と同じか、又はスペーサー領域1及び2各々とは独立して機能可能なものである。)、及び変異のある、ターゲットサイト1と同じ側であって、かつ遺伝子2に近い側の一方のアーム領域、及び野生型である他方のアーム領域からなるもの を準備し; (1) ターゲットサイト1と組込カセットとを、Creによって反応させ、反応生成物を得る工程;そして (2) 該反応生成物と置換カセットとを、Creよって反応させる 工程を含む、染色体上で2以上の組換えを行うための、遺伝子組換え方法。
IPC (1)：
C12N 15/09
FI (1)：
C12N15/00 A
F-Term (9)：
4B024AA20 ,  4B024BA11 ,  4B024CA04 ,  4B024DA02 ,  4B024EA04 ,  4B050CC03 ,  4B050DD20 ,  4B050LL05 ,  4B050LL10
Article cited by the Patent：
Cited by examiner (5)
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