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J-GLOBAL ID：200903076832171940

新規なソルビトールデヒドロゲナーゼ、その製造方法並びに該酵素を用いたソルビトールの定量のための試薬及び方法

Inventor： 南原 智之 ,  鈴木 勝
Applicant, Patent owner： キッコーマン株式会社
Agent (1)： 平木 祐輔 (外1名)
Gazette classification：公開公報
Application number (International application number)：1994296701
Publication number (International publication number)：1996033482
Application date： Nov. 30, 1994
Publication date： Feb. 06, 1996
Summary：

【要約】【構成】 NAD+ の存在下で、D-ソルビトールを酸化してD-フルクトースとNADH生成し、また本反応の逆反応によって、NADHの存在下で、D-フルクトースを還元してD-ソルビトールとNAD+ を生成する熱安定性に優れた新規なソルビトールデヒドロゲナーゼ、シュードモナス属に属し、ソルビトールデヒドロゲナーゼ生産能を有する菌株を用いる該酵素の製造方法、並びに該酵素及びNAD+ を用いたD-ソルビトールの定量のための試薬及び方法。【効果】 本酵素は、D-ソルビトールの酵素的測定法に極めて有用であり、従来になく酵素活性が安定であり、本酵素を用いれば、D-ソルビトール量又はD-フルクトース量を精度よく測定することが可能である。また本発明の製造方法を用いれば、容易にそして安価に本酵素を製造することができる。更に、本発明の試薬及び方法によれば、D-ソルビトール量を精度よく測定することが可能である。

Claim (excerpt)：

下記の理化学的性質を有するソルビトールデヒドロゲナーゼ。(1)作用:NAD+ の存在下で、D-ソルビトールを酸化してD-フルクトースとNADHを生成し、また本反応の逆反応によって、NADHの存在下で、D-フルクトースを還元してD-ソルビトールとNAD+ を生成する。(2)基質特異性:D-ソルビトール及びガラクチトールに特異的に作用する。(3)至適pH及び安定pH範囲:至適pHは10近辺であり、安定pH範囲は、30°C、4時間処理で、pH5.5〜10.5である。(4)作用適温の範囲:100mMトリス-塩酸緩衝液(pH9.0)で作用適温の範囲は、50°C近辺である。(5)pH、温度などによる失活の条件:30°C、4時間処理で、pH5.5〜10.5で安定あり、pH5.0以下及びpH11.0以上で完全に失活する。pH7.0において、30分間処理で、40°C近辺まで安定であり、またpH7.0で40°Cの条件において24時間で完全に失活する。(6)阻害:HgCl2 によって強く阻害される。(7)分子量:約64,500±5,000(ゲルろ過法)。

IPC (3)：

C12N 9/04 ,  C12Q 1/32 ,  C12R 1:38