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J-GLOBAL ID：200903077164117470

乳酸菌中の分泌シグナルを分離する方法及びラクトコッカス・ラクティスから分離された新規な分泌シグナル

Inventor： ラヴィン,ペーター ,  マドセン,ソレン,ミハエル ,  ラング,アスリッド ,  イスラエルセン,ハンス ,  ジョンセン,マッズ,グロエンヴォルド ,  ブレッドモーゼ,ラース ,  アーナル,ジョゼ
Applicant, Patent owner： バイオテクノロジスク インスティテュート
Agent (1)： 野河 信太郎
Gazette classification：公表公報
Application number (International application number)：2001515845
Publication number (International publication number)：2003516119
Application date： Aug. 04, 2000
Publication date： May. 13, 2003
Summary：

【要約】LRとレポーター遺伝子との間の領域が欠失しており、かつ分泌レポーター分子をコードするDNA分子からなるDNA分子由来のプロモーターを持たないレポーター遺伝子を含むトランスポゾンからなるDNA分子を用いて、乳酸菌中でシグナルペプチドをコードするヌクレオチド配列を同定する方法。LRとレポーター遺伝子間の領域を欠失することによって、分泌レポーター分子とともにフレーム中にある停止コドンが除かれ、転位によりLRの上流から翻訳融合が可能になる。

Claim (excerpt)：

(i)プロモーターを持たないプロモーターレポーター遺伝子及びリボソーム結合部位(RBS)からなる配列を左方末端(LR)と右方末端(RR)との間に含むトランスポゾンからなるDNA分子を選択する工程、(ii)前記DNA分子からLRとプロモーターを持たないレポーター遺伝子の間に位置する領域を削除し、転位能及びRBSを保持する修飾DNA分子を得る工程、(iii)得られた修飾DNA分子のLRとプロモーターを持たないレポーター遺伝子との間に位置する残存領域に、ユニーク制限部位を挿入する工程、及び(iv)前記のユニーク制限部位に、分泌レポーター分子をコードするDNA配列であって、SPをコードする配列を含まないDNA配列を挿入する工程からなり、このようにして得られたトランスポゾン誘導体は、分泌レポーター分子とともにフレーム中に停止コドンを持たないため、転位時にLRの上流からの翻訳融合を可能にする、乳酸菌中でシグナルペプチド(SP)をコードするDNA配列を同定するためのトランスポゾン誘導体を構築する方法。

IPC (6)：

C12N 15/09 ZNA ,  C12N 1/21 ,  C12Q 1/34 ,  C12R 1:225 ,  C12R 1:46 ,  C12R 1:01

FI (6)：

C12N 1/21 ,  C12Q 1/34 ,  C12R 1:225 ,  C12R 1:46 ,  C12R 1:01 ,  C12N 15/00 ZNA A

F-Term (28)：

4B024AA11 ,  4B024BA80 ,  4B024CA04 ,  4B024CA07 ,  4B024DA05 ,  4B024EA04 ,  4B024FA02 ,  4B024FA04 ,  4B024FA10 ,  4B024FA18 ,  4B024GA11 ,  4B024HA03 ,  4B024HA11 ,  4B063QA20 ,  4B063QQ06 ,  4B063QQ13 ,  4B063QQ34 ,  4B063QR66 ,  4B063QS02 ,  4B063QX02 ,  4B065AA01X ,  4B065AA30X ,  4B065AA49X ,  4B065AA53X ,  4B065AB01 ,  4B065BA02 ,  4B065CA24 ,  4B065CA46

Article cited by the Patent：

Cited by examiner (1)

• Appl.Environ.Microbiol.,(1995),61(7),p2540-2547