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J-GLOBAL ID：200903077534813064

テロメレース活性測定方法

Inventor： 原田 直純 ,  中村 秀男
Applicant, Patent owner： 三菱ウェルファーマ株式会社
Agent (1)： 高柳 昌生
Gazette classification：公開公報
Application number (International application number)：2000363301
Publication number (International publication number)：2002165595
Application date： Nov. 29, 2000
Publication date： Jun. 11, 2002
Summary：

【要約】【課題】 生きた細胞内のテロメレース活性測定方法を提供する。【解決手段】 以下の工程を含む、生きた細胞内のヒト・テロメレース活性測定方法とする:(A)ヒト・テロメレース伸長用オリゴDNAプライマーを、カチオン脂質キャリアにより生きた細胞に導入し、細胞内テロメレースによりヒト・テロメア配列TTAGGGの繰り返し配列からなるDNA配列を前記ヒト・テロメレース伸長用オリゴDNAプライマーの3’末端に伸長させてヒト・テロメレース反応産物を調製する工程、(B)ヒト・テロメレース反応産物を細胞内から抽出し、該ヒト・テロメレース反応産物と、センス・プライマーとアンチセンス・プライマーとを用いて、PCRを利用したストレッチPCR法により増幅してPCR産物を得る工程、(C)前記(B)工程で得られたPCR産物を定量する工程。

Claim (excerpt)：

以下の工程を含む、生きた細胞内のヒト・テロメレース活性測定方法:(A)5’末端側にある第1のタグ配列、及びヒト・テロメア配列TTAGGG以外の繰返し配列からなる3’末端側合成開始配列とを含むヒト・テロメレース伸長用オリゴDNAプライマーを、カチオン脂質キャリアにより生きた細胞に導入し、細胞内テロメレースによりヒト・テロメア配列TTAGGGの繰り返し配列からなるDNA配列を前記ヒト・テロメレース伸長用オリゴDNAプライマーの3’末端に伸長させてヒト・テロメレース反応産物を調製する工程、(B)前記工程(A)で得られたヒト・テロメレース反応産物を細胞内から抽出し、該ヒト・テロメレース反応産物と、センス・プライマーとしての前記ヒト・テロメレース伸長用オリゴDNAプライマーと、アンチセンス・プライマーとしての、第1のタグ配列と相補性がなく5’末端側にある第2のタグ配列及びヒト・テロメア配列の相補配列CCCTAAの繰返し配列からなる3’末端側DNA配列を含むアンチセンス・オリゴDNAプライマーとを用いて、PCRを利用したストレッチPCR法により増幅してPCR産物を得る工程、(C)前記(B)工程で得られたPCR産物を測定する工程。

IPC (5)：

C12N 15/09 ZNA ,  A61K 45/00 ,  A61P 35/00 ,  A61P 43/00 111 ,  C12Q 1/68

FI (5)：

A61K 45/00 ,  A61P 35/00 ,  A61P 43/00 111 ,  C12Q 1/68 A ,  C12N 15/00 ZNA A

F-Term (24)：

4B024AA01 ,  4B024AA11 ,  4B024BA11 ,  4B024CA01 ,  4B024GA13 ,  4B024HA11 ,  4B063QA05 ,  4B063QQ02 ,  4B063QQ34 ,  4B063QQ95 ,  4B063QR08 ,  4B063QR32 ,  4B063QR42 ,  4B063QR59 ,  4B063QR62 ,  4B063QS02 ,  4B063QS25 ,  4B063QS32 ,  4B063QS34 ,  4B063QX02 ,  4C084AA27 ,  4C084NA14 ,  4C084ZB262 ,  4C084ZC202