高等植物のプロモーター活性の解析用ベクター及びその利用方法

Inventor： , , ,
Applicant, Patent owner：
Agent (2)：下田昭 , 赤尾謙一郎
Gazette classification：再公表公報
Application number (International application number)：JP2007071085
Publication number (International publication number)：WO2008059711
Application date： Oct. 30, 2007
Publication date： May. 22, 2008
Summary：

【課題】高等植物でのプロモーターを定性的かつ定量的に解析のための相同組換えによるノックイン法の開発が強く望まれていた。【解決手段】本発明は、T-DNA由来のRBとLBとの間に下記の要素をRBから下記の順に含むことにより構成された、高等植物のプロモーター活性の解析用ベクターである。(1)発現可能に存在させた、第一のネガティブ選抜マーカー遺伝子(2)宿主ゲノム中の標的プロモーターの3’末端を含む500〜6000bpの塩基配列から成る第一の相同組換え領域(3)その開始コドンが前記プロモーターの3’末端から所望の間隔離れたレポーター遺伝子(4)発現可能に存在させたポジティブ選抜マーカー遺伝子(5)宿主ゲノム中の前記第一の相同組換え領域に続く500〜6000bpの塩基配列から成る第二の相同組換え領域(6)発現可能に存在させた、第一のネガティブ選抜マーカー遺伝子と同一であってもよい第二のネガティブ選抜マーカー遺伝子このベクターを用いて抽出しやすい組織などで高発現するプロモーターを検索することにより、有用タンパク質遺伝子や有用物質生産に係る遺伝子をつなげ、有用タンパク質を大量生産すること等ができる。【選択図】なし

Claim (excerpt)：

T-DNA由来のRB(Right Border配列)とLB(Left Border配列)との間に下記の要素をRBから下記の順に含むことにより構成された、高等植物のプロモーター活性の解析用ベクター。 (1)発現可能に存在させた、第一のネガティブ選抜マーカー遺伝子 (2)宿主ゲノム中の標的プロモーターの3’末端又は標的遺伝子の5’領域を含む500〜6000bpの塩基配列から成る第一の相同組換え領域 (3)その開始コドンが前記標的プロモーターの3’末端から所望の間隔離れたレポーター遺伝子 (4)発現可能に存在させたポジティブ選抜マーカー遺伝子 (5)宿主ゲノム中の前記第一の相同組換え領域に続く500〜6000bpの塩基配列から成る第二の相同組換え領域 (6)発現可能に存在させた、第一のネガティブ選抜マーカー遺伝子と同一であってもよい第二のネガティブ選抜マーカー遺伝子

IPC (4)：

C12N 15/09 , A01H 1/00 , A01H 5/00 , C12Q 1/02

FI (4)：

C12N15/00 A , A01H1/00 A , A01H5/00 A , C12Q1/02

F-Term (17)：

2B030AA02 , 2B030AB04 , 2B030AD08 , 2B030CA17 , 2B030CB01 , 4B024AA08 , 4B024AA11 , 4B024BA80 , 4B024CA02 , 4B024DA01 , 4B024EA04 , 4B024FA02 , 4B063QA08 , 4B063QQ04 , 4B063QR33 , 4B063QS05 , 4B063QX01

Patent cited by the Patent：

Cited by applicant (1)

高等植物のゲノム改変法
Gazette classification：再公表公報 Application number：JP2002008506 Applicant：日本たばこ産業株式会社, シンジェンタリミテッド

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