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J-GLOBAL ID:201103045040523070

細胞特異的cDNAの分離法及びライブラリー作製法

Inventor:
Applicant, Patent owner:
Agent (1): 西川 繁明
Gazette classification:特許公報
Application number (International application number):1992215395
Publication number (International publication number):1994038760
Patent number:3315439
Application date: Jul. 21, 1992
Publication date: Feb. 15, 1994
Claim (excerpt):
【請求項1】 異なる2種以上の細胞で発現している遺伝子間で差し引きを行い、細胞特異的に発現している遺伝子を分離する方法であって、(1)細胞Aで発現しているmRNAよりラベル化プライマーを用いて該mRNAに相補的なラベル化cDNAを合成し、次いで、該ラベル化cDNAをラベル部分と特異的に結合する分離用粒子と結合させて、生成した分離用粒子・ラベル化cDNA複合体を特異的に分離するステップ1、(2)細胞Bで発現しているmRNAよりラベル化プライマーを用いて該mRNAに相補的なラベル化cDNAを合成し、次いで、該ラベル化cDNAをラベル部分と特異的に結合する分離用粒子と結合させた後、該cDNAに相補的なDNAを新たに合成し、合成されたDNAのみを回収するステップ2、(3)ステップ1で得られた分離用粒子・ラベル化cDNA複合体とステップ2で回収したDNAとを混合して、ハイブリダイズさせるステップ3、及び(4)ステップ3でハイブリダイズしなかった細胞B由来のDNAを回収するステップ4、の各ステップを含むことを特徴とする特定の細胞に特異的なcDNAの分離法。
IPC (1):
C12N 15/09
FI (1):
C12N 15/00 A

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