熱安定性アシルCoAシンテターゼ及びその製造方法

Inventor： , , , , ,
Applicant, Patent owner：
Agent (2)：西木信夫 , 松田朋浩
Gazette classification：公開公報
Application number (International application number)：2014039501
Publication number (International publication number)：2015163050
Application date： Feb. 28, 2014
Publication date： Sep. 10, 2015
Summary：

【課題】本発明は、優れた安定性を備え、臨床検査において常用される温度(30〜37°C)でも十分活性が示されるアシルCoAシンテターゼを遺伝子工学的手法にて提供することを目的とする。【解決手段】シュードモナス・フラジ由来のアシルCoAシンテターゼのアミノ酸配列において特定のアミノ酸残基を他のアミノ酸残基に置換することにより、常温(30〜37°C)における活性を備えさせつつ、熱安定性や溶液中での安定性を飛躍的に向上させ得る。【選択図】なし

Claim (excerpt)：

下記(A)〜(C)のいずれかに示すポリペプチド: (A)配列番号1に示すアミノ酸配列における、528番目、541番目、553番目、228番目、420番目、360番目、50番目、53番目、105番目、111番目、118番目、222番目、240番目、265番目、423番目、424番目、460番目、462番目、540番目、及び542番目よりなる群から選択される少なくとも1つのアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列からなるポリペプチド、 (B)配列番号1に示すアミノ酸配列における、528番目、541番目、553番目、228番目、420番目、360番目、50番目、53番目、105番目、111番目、118番目、222番目、240番目、265番目、423番目、424番目、460番目、462番目、540番目、及び542番目よりなる群から選択される少なくとも1つのアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列において、前記アミノ酸置換部位以外のアミノ酸の1個又は数個が置換、付加、挿入又は欠失されてなり、且つ、アシルCoAシンテターゼ活性を有し、配列番号1に示すアミノ酸配列からなるアシルCoAシンテターゼと比較して安定性が向上しているポリペプチド、 (C)配列番号1に示すアミノ酸配列における、528番目、541番目、553番目、228番目、420番目、360番目、50番目、53番目、105番目、111番目、118番目、222番目、240番目、265番目、423番目、424番目、460番目、462番目、540番目、及び542番目よりなる群から選択される少なくとも1つのアミノ酸が他のアミノ酸に置換されたアミノ酸配列において、配列番号1に示すアミノ酸配列に対する前記アミノ酸置換部位を除いた配列同一性が80%以上であり、且つ、アシルCoAシンテターゼ活性を有し、配列番号1に示すアミノ酸配列からなるアシルCoAシンテターゼと比較して安定性が向上しているポリペプチド。

IPC (6)：

C12N 15/09 , C12N 1/15 , C12N 1/19 , C12N 1/21 , C12N 5/10 , C12N 9/00

FI (6)：

C12N15/00 A , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12N5/00 101 , C12N9/00

F-Term (17)：

4B024AA11 , 4B024BA07 , 4B024CA04 , 4B024CA20 , 4B024DA06 , 4B024EA04 , 4B024GA11 , 4B050CC04 , 4B050DD02 , 4B050LL03 , 4B065AA26X , 4B065AA41Y , 4B065AB01 , 4B065AC14 , 4B065BA02 , 4B065CA29 , 4B065CA46

Patent cited by the Patent：

Cited by examiner (1)

特許第3400809号

Article cited by the Patent：

Cited by examiner (3)

Current Opinion in Biotechnology, 2001年, Vol.12, p.371-375
Protein Engineering, Design & Selection, 2011年, Vol.24, No.8, p.597-605
Protein Expression and Purification, 1994年, Vol.5, p.270-277

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