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J-GLOBAL ID：201503023638351687

3段階方式矩形波多重パルスを利用した藻類細胞への遺伝子導入法

Inventor： 福澤 秀哉 ,  山野 隆志 ,  伊福 健太郎 ,  早川 靖彦
Applicant, Patent owner： 国立大学法人京都大学 ,  ネッパジーン株式会社
Agent (1)： 矢野 裕也
Gazette classification：特許公報
Application number (International application number)：2013138581
Publication number (International publication number)：2015008708
Patent number：5721191
Application date： Jul. 02, 2013
Publication date： Jan. 19, 2015
Claim (excerpt)：

【請求項1】 細胞壁を有した状態の緑藻類細胞と核酸分子を含有する溶液に対して、前記溶液に1回又は2回以上の下記(A)に記載の条件を満たす矩形波電気パルスを、電力量の合計が1.3〜4.9J/100μLになるように与え;次いで下記(B1)及び(B2)に記載の条件を満たす矩形波電気パルスを2回以上与え、;次いで下記(C1)〜(C3)に記載の条件を満たす矩形波電気パルスを2回以上与えることにより、;3段階方式矩形波多重パルスによる電気穿孔を行うことを特徴とする、真核藻類の細胞に外来遺伝子を導入する方法。 (A):1パルスの電圧が750V/cm以上である矩形波電気パルス。 (B1):1パルスの電圧が150V/cm以下である矩形波電気パルス。 (B2):1パルスの電力量が0.02〜0.6J/100μLである矩形波電気パルス。 (C1):上記(B1)及び(B2)に記載の条件を満たす電気パルスとは逆の極性の矩形波電気パルス。 (C2):1パルスの電圧が150V/cm以下である矩形波電気パルス。 (C3):1パルスの電力量が0.02〜0.6J/100μLである矩形波電気パルス。

IPC (4)：

C12N 15/09 ( 200 6.01) ,  C12N 1/13 ( 200 6.01) ,  A01H 1/00 ( 200 6.01) ,  A01H 13/00 ( 200 6.01)

FI (4)：

C12N 15/00 A ,  C12N 1/13 ZNA ,  A01H 1/00 A ,  A01H 13/00